罗布麻茶中槲皮素的含量测定研究.docVIP

罗布麻茶中槲皮素的含量测定研究 代光秀 （山东省临沂市中医院 临沂 276003 ） 摘要 目的：建立HPLC法测定罗布麻茶中槲皮素的含量 方法：流动相：以甲醇－0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；色谱柱：Kromasil C18色谱柱（250×4.6mm，5μm）；检测波长为371nm；柱温30℃。结果：槲皮素线性范围为5.98～47.84?g/ml，回归方程为A＝C×7750.68＋1196.33（r＝0.9997）。结论：本方法可以准确测定罗布麻茶中槲皮素的含量。 关键词：罗布麻茶 HPLC 槲皮素 含量测定 Determination the content of quercetin in Luobuma Tea By HPLC Dai Guang-xiu (Shan Dong Province Lin Yi City Chinese Traditional Medicine Hospital,Linyi 276003,China) Abstract:Aim: To determine mean quercetin in the LuobumaTea by HPLC.Method: the mobile phase consisted of methanol-0. 4% phosphoric acid(50:50), Kromasil C18column（250×4.6mm，5μm）, the wavelength for measurement was at 371nm at 30℃.Result: The calibration curves were linear in the range of 5.98～47.84?g /ml for quercetin，regression equation A＝C×7750.68＋1196.33（r＝0.9997）.Conclusion:This method can be used to determine accurately the content of quercetin in Luobuma Tea. KEY WORDS:Luobuma Tea Quercetin HPLC Determination 罗布麻茶为单味药材罗布麻Apocynum venetum L.的叶经烘干粉碎制成的单方制剂， 具有平肝安神，清热利水。临床用于肝阳眩晕、心悸失眠、浮肿尿少。高血压病，神经衰弱，肾炎浮肿。。 1．仪器与试剂 岛津LC－10AD VP高效夜相色谱仪，SPD－10A VP紫外检测器，HT－230A柱温箱；Kromasil C18色谱柱（250×4.6mm，5?）；岛津UV－2401紫外分光光度计；Sartorius BP211D电子天平（准确到0.01mg）;槲皮素对照品（供含量测定用，批号100081-200406，纯度97.3%，购自中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。 2．实验方法与结果 2.1色谱分析条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为371nm；柱温30℃。理论板数按槲皮素峰计算应不低于4000[2,3]。见图1、2。 图1对照品HPLC色谱图 图2样品HPLC色谱图 图2样品HPLC色谱图 2.2 对照品溶液的制备 精密称取槲皮素对照品6.15mg，置于100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液（浓度为59.84?g/ml）。 2.3 供试品溶液的制备 取本品内容物（过三号筛）约0.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，加甲醇－25%盐酸溶液（4：1）20ml，加热回流1小时，取出，放冷，滤过，将滤液转移至100ml量瓶中，加甲醇－25%盐酸溶液（4：1）稀释至刻度，摇匀，即得。 2.4 方法学考察 2.4.1 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8ml，置于10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，得对照品溶液1、2、3、4、5（浓度分别为5.98、11.97、23.94、35.90、47.84?g /ml）。每份溶液进2针，记录峰面积，以峰面积A为纵坐标Y，对照品浓度（?g /ml） 图3标准曲线图 C为横坐标X，计算回归方程。得回归方程A＝C×7750.68＋1196.33（r＝0.9997），线性范围为5.98～47.84?g/ml。见图3。 2.4.2 稳定性实验 取重复性试验中批供试品溶液为精密度试验考察对象,分别在0、1、2、4、6小时进行，平均峰面积的RSD的0.86%，结果表明供试品在8h内测定稳