WRKY研究进展.docVIP

植物WRKY转录因子研究进展 摘要：WRKY转录因子起源很早，因其N-端含有高度保守的WRKYGQK序列而得名。目前在拟南芥中已经发现74个WRKY成员，在水稻中发现了109个WRKY成员[1,2]。WRKY转录因子通过结合靶基因启动子区域W盒(C/T)TGAC(T/C) [3-6]核苷酸序列而调控相应基因表达[6-8]。WRKY转录因子参与了植物损伤、衰老[6,9,10]、生长发育及代谢、植物防御等多种植物进程[1,11]，并且还响应各种非生物胁迫，如高盐、热、干旱和冷等[12-17]。 1. WRKY 转录因子起源和结构特点： 最早被鉴定的植物WRKY基因是甘薯（Impoea batatas）SPF1（SPF1:SWEET POTATO FACTOR1）基因，其基因产物特异地与甘薯Sporamin基因和β-淀粉酶基因启动子区域的SP8序列识别，从而参与并调控植物糖信号途径的建立[18]。 高等植物典型的转录因子一般由4个功能区域组成，即，DNA结合域、核定位信号和寡聚化位点。在WRKY转录因子中，最主要的结构特点是各成员的DNA结合域中都至少含有一个WRKY结构域。WRKY结构域是一段大约由60个氨基酸残基所组成的多肽序列，其中WRKYGQK为所有成员中高度保守的7个氨基酸残基。除上述比较保守的区域外，WRKY成员中其余氨基酸组成的同源性并不高。此外，WRKY转录因子的DNA结合域中一般还含有一个锌指结构[19]。根据转录因子所含有的WRKY结构域的个数和锌指结构的特征，一般将WRKY转录因子分为3大类[7]：第I组WRKY转录因子含有2个WRKY结构域，且锌指结构的氨基酸组成类型为C2H2型，如AtWRKY2,AtWRKY34, AtWRKY58，该类WRKY转录因子的DNA结合功能主要由C-末端的WRKY结构域介导；第II组和第III组通常只含有一个WRKY结构域。第II组成员的锌指结构也是C2H2型，并且第II组WRKY结构域序列与第I组WRKY转录因子C-末端WRKY结构域序列相似性比较高，这说明I组WRKY转录因子C-末端WRKY结构域与其他类型中只含1个WRKY结构域的功能相同，即与靶DNA相互结合。第III组成员锌指结构与其他两组不同，结构模式为C2-HC型。此外，第II组成员又可根据主要的氨基酸序列组成分为IIa，IIb，IIc，IId和IIe[38]。 尽管WRKY结构域中存在高度保守的WRKYGQK序列，但在水稻WRKY成员中，存在着19个变异的WRKY结构域，其中WRKYGEK和WRKYGKK是两个普通的变异体，另外几个是WRICGQK、WRMCGQK、WKKYGQK、WKRYGQK、WSKYEQK和WRKYSEK，它们在水稻中均各只含有1个[20]，这可能是水稻中WRKY转录因子的原始共同祖先在长期进化过程中产生变异的结果。另外，在拟南芥WRKY转录因子的结构域中也发现了相同的变异与进化现象。 转录因子通过与基因启动子区域特定的核苷酸序列专一性结合来调节基因的转录WRKY转录因子的专一识别序列是(C/T)TGAC(T/C)片段，即W-盒[7]。其中TGAC为W-盒的核心序列。W-盒在受病原菌诱导或与植物防卫反应相关基因、发育代谢基因和WRKY基因本身的启动子区域中出现频率较高[21]，并且，有功能的W-盒常成簇存在于启动子序列中，协同发挥作用[22]，说明WRKY蛋白通过与此类W-盒的结合参与防卫反应、发育及代谢等信号。 WRKY转录因子在转录水平上对靶基因进行调控，WRKY蛋白大部分定位与细胞核，对一些WRKY蛋白氨基酸序列分析发现，在WRKY结构域以外存在细胞核定位信号区（NLS），这意味着WRKY蛋白在胞质中合成后，通过跨膜运输进入细胞核发挥作用。体外瞬间实验也证明了一些存在NLS的WRKY蛋白定位于细胞核[23]。但并非预测的NLS一定是有功能的，AtWRKY6有3个预测的NLS，一个单位点和两个双位点，但缺失、点突变和功能性获得实验表明，这3个NLS都不参与核定位[24]。 WRKY转录因子家族在转录调控中扮演者转录激活子或者抑制子的角色，也可以在某一些生理过程是激活子，在另外的生理过程中又作为抑制子发挥作用[25]。 2. WRKY转录因子的调控功能 目前研究表明，WRKY在植物体内并非组成型表达，而是受各种环境因子（如病原体、信号分子水杨酸及其功能类似物、干旱、低温、创伤、机械胁迫等各种非生物胁迫和生物胁迫）的诱导表达，并且其表达具有组织特异性。Dong等研究了72个AtWRKY基因在拟南芥防御应答反应中的表达动态，结果表明Pseudomonas syringe侵染或SA处理拟南芥时有49个AtWRKY的表达水平发生明显变化[5]。因此，WRKY转录因子可能参与植物体内各种