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实验三微生物涂片技术及细菌简单染色法.ppt
实验三微生物涂片技术及细菌单染色法 一、实验目的: 1.了解染色的基本原理; 2.学习微生物制片与染色技术; 3.掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。 二、实验原理: 单染色法是利用一种染色剂对涂片进行染色的方法。在一般情况下,细菌菌体多带负电荷,易于和带正电荷的碱性染料结合,因此多用碱性染料进行染色。 常用的碱性染料有美蓝、孔雀绿、碱性复红、结晶紫和番红等。 三、实验器材 显微镜,酒精灯,火柴,载玻片,接种环,双层瓶,吸水纸,擦镜纸,蒸馏水; 石炭酸复红染色液; 枯草芽孢杆菌,37℃培养8小时的斜面菌种; 四、实验步骤 1. 涂片 取一小滴蒸馏水于干净的载玻片上,用接种环挑取枯草芽孢杆菌菌体于水滴中,涂成均匀的一薄层,在空气中自然干燥。 2. 固定 将载玻片有菌面向上,手持载玻片一端,迅速通过酒精灯火焰2~3次。 3. 染色 滴加染色液于载玻片的涂布区,染2~3分钟 4. 水洗 倾去染液,用自来水从标本表面未染色部分开始冲洗,经染色部分缓慢流下,直至冲下来的水无色为止。 5. 干燥 用吸水纸吸净标本上多余的水,自然干燥。 6. 镜检 置高倍镜或油镜下观察细菌的形态。 7. 结果 * 无菌操作过程 *
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