对MGC-803胃癌细胞株癌基因表达及调控的实验研究_医学论文.docVIP

对MGC-803胃癌细胞株癌基因表达及调控的实验研究_医学论文 对MGC-803胃癌细胞株癌基因表达及调控的实验研究_医学论文 作者：孟红子 李日镛 孙抒 金昌范 【关键词】 癌基因 　　【Abstract】 Objective To study the regulation of rTNF，rIL-6，rIL-2， 60 Co-rays on the expression of the genes of P53，APC and c-Ha-ras by using human gastric carcinoma cell line MGC803as the model.Methods The expression levels of P53，APC and c-Ha-ras mRNA of human gastric carcinoma cell line MGC803were detected by in situ hybridization technique，and the expression level of the c-fos protein was detected through immunohistocheˉmical SP（Stretavidin/Peroxidase）method.Results It was found that human gastric carcinoma cell line MGC803can’t express P53and APC，but can express C-Ha-ras and c-fos highly.The results were shown as follows:The expression of P53was induced 0.01The expressions of c-Ha-ras and c-fos were inhibited 0.01by rTˉNFThe expressions of c-fos was inhibited rIL-60.01The expressions of C-fos was inhibited rIL-20.01.There were no genetic expressions in the early stage of irradiation（6h），however，there were expressions of c-Ha-ras and c-fos in various degrees during the late stage.Conclusion There is the regulation of rTNF，rIL-6，rIL-2， 60 Co-rays，on the expression of the genes of P53，APC and c-Ha-ras to human gastric carcinoma cell line MGC803. 　　Key words oncogene the regulation of genetic expression cytokine immunocompetent cell 　　肿瘤分子生物学研究表明，肿瘤的发生、发展是一个多阶段、多基因变异所致的病理过程，包括原癌基因的激活、抑癌基因的失活以及细胞凋亡相关基因的变异。近年来，发现一些细胞因子作为诱导剂，启动肿瘤细胞分化，某些细胞因子具有改变肿瘤细胞癌基因表达。有学者报道 ［1］ ，干扰素可减少肿瘤细胞ras癌基因的表达，重组人肿瘤坏死因子（rTNF）降低卵巢癌3AO细胞c-erbB-2蛋白表达 ［2］ 。本文应用原位分子杂交法及免疫组织化学SP法检测了MGC-803胃癌细胞P53、APC、c-Ha-ras、c-fos基因，并以其为模型，观察rTNF、rIL-2、rIL-6、 60 Co放射线对上述基因的表达调控作用，以探讨这些生物应答调节剂对癌基因表达的影响及其抗肿瘤机制，为进一步临床应用提供实验依据。 　　1 材料与方法 1.1 主要试剂 RPMI-1640为Life Technologies公司产品，rIL-2、rIL-6为北京四环医学高技术开发部产品，r TNF为邦定生物医学公司产品。 　　c-fos抗体为Santa Cruz公司产品，Ⅱ抗为生物素标记的抗兔IgG，Ⅲ抗为辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。Ⅱ抗及Ⅲ抗均为美国VECTOR公司产品。 　　原位分子杂交所用的P53、APC、c-Ha-ras生物素标记探针均购自北京医科大学病理学教研室，BCIP/NBT为美国ZYMED公司产品。 　　1.2 肿瘤细胞 MGC-803胃癌细胞株由中国医科大学肿瘤研究所张荫昌教授提供，