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对山东地区TTV基因片段的检测及其部分核酸序列测定_医学论文 对山东地区TTV基因片段的检测及其部分核酸序列测定_医学论文 作者：于建国　商庆华　任 浩　肖德明　尹燕明　白 薇　戚中田　张光曙 【关键词】 输血传播 关键词: 输血传播，病毒肝炎，非甲～戊型核酸，序列 摘 要:目的 了解山东地区输血传播病毒（TTV）分离株感染状况及基因变异的情况. 方法 应用逆转录―聚合酶链反应法（RT-PCR）检测山东地区26例非甲～戊型肝炎和12例肝细胞癌患者血清中的TTV DNA，对阳性扩增的产物进行测序，并分析其基因变异情况. 结果 26例非甲～戊型肝炎患者检出TTV DNA阳性者11例（42%）.对其中2例（TTVSD4，TTVSD5）进行PCR产物直接测序，并与日本株（AB008394）相比较，其核苷酸序列同源性分别为99.9%和100%.而12例肝细胞癌患者中TTVDNA阳性3例（25%），对其中1例（TTVSD6）测序，与日本株（AB008394）相比较，其核苷酸序列同源性为99%TTVSD4、TTVSD5和TTVSD6之间的核苷酸同源性均为99%. 结论 山东地区非甲～戊型肝炎和肝细胞癌患者中TTV感染率较高，测序结果表明其与日本株（AB008394）有较高的同源性. Keywords:transfusion transmitted virusnonA-E hepatitisNucleotide sequence 　　Abstract:AIM To investigate the prevalence of TTV infec-tion and genetic variation of TTV isolate in Shandong Province.METHODS TTV DNA were amplified and de-tected by RT-PCR methods from sera of patients with nonA-E hepatitis（n=26）and hepatocellular carcinoma（n=12）.The positive PCR products were sequenced and analyzed for genetic variation.RESULTS TTV DNA were detectable in11of26patients（42.3%）with nonA-E hepatitis.Two of them（TTVSD4，TTVSD5）were sequenced and compared with known sequence of TTV isolates in Japan（AB008394）.The nucleotide homology was99%and100%.TTV DNA was positive in3of12patients（25%）with hepatocellular carcinoma.One of them（TTVSD6）was sequenced and com-pared with AB008394.The nucleotide homology was99%.CONCLUSION TTV infection is high in the nonA-E hepati-tis and hepatocellular carcinoma patients in Shandong province.The secquence results showed that the TTV isolate in Shandong province has high homology with TTV isolate AB008394in Japan. 　　0 引言 　　以往研究认为，TTV感染具有致病性，同输血或血制品密切相关，可能是导致肝功能长期损害的又一致病因子.为探讨山东地区非甲～庚肝炎和肝癌患者TTV感染状况和基因变异的情况，并阐明TTV在人类肝炎中的作用、地位及其传播途径，我们检测了非甲～戊型肝炎和肝癌患者血清中TTV的感染率，并对其中3例TTV阳性患者进行序列分析. 　　1 对象和方法 　　1.1 对象 1998-03/2000-09解放军第88医院、济南军区肝病研究所、泰安市中心医院和泰山医学院附属医院临床与病理确诊为非甲～庚肝炎患者26（男19，女7）例，平均年龄（37±1.4）岁.患者有输血或输血制品、手术、拔牙、针灸、注射以及与肝炎患者密切接触史者17例.这些非甲～戊型肝炎排除甲～庚型肝病毒、EBV、CMV感染.肝癌患者12（男8，女4）例，平均年龄（34±8.8）岁.其中有输血或输血制品、