比浊法自动测定乙酰螺旋霉素片的效价_药学论文.docVIP

比浊法自动测定乙酰螺旋霉素片的效价_药学论文 比浊法自动测定乙酰螺旋霉素片的效价_药学论文 【摘要】 目的 建立比浊法测定乙酰螺旋霉素片的方法。方法 金葡菌为实验菌，加菌量约0.5%(V/V)，(37±0.5)℃培养3.5～4.5h测定。结果 抗生素线性浓度为3.2～15.6μg/ml，平均回收率为100.7%(n=9)，RSD=1.4%。结论 本方法操作方便、快速，灵敏、可信限率低，结果准确，精密度好，可作为乙酰螺旋霉素片效价的测定方法。 【关键词】 效价； 比浊法； 乙酰螺旋霉素 ABSTRACT Objective To establish a turbidimetric method for the content determination of acetylspiramycin tablets. Method The test organism was Staphylococcus aureus. Adjust the bacterial suspension of Staphylococcus aureus inoculation with about 0.5% (V/V) ratio, at (37±0.5)℃ for 3.5～4.5 hours. Results The linear range was 3.2 μg/ml～15.6 μg/ml and the average recovery was 100.7% (n=9); RSD=1.4%. Conclusion The method was sensitive, rapid, precise and feasible for the determination of Acetylspiramycin tablets. KEY WORDS Potency; Turbidimetric method; Acetylspiramycin tablets 乙酰螺旋霉素是螺旋霉素乙酰化衍生物，属半合成大环内酯抗生素，是单乙酰螺旋霉素II、单乙酰螺旋霉素III与双乙酰螺旋霉素II、双乙酰螺旋霉素III四个组分为主的混合物，毒性低，不良反应小，较广泛有效地应用于金葡菌、链球菌、肺炎杆菌、大肠埃希菌、淋球菌等引起的感染［1］。 因乙酰螺旋霉素为多组分抗生素，一般的化学分析方法或高效液相色谱法均无法测定其含量，虽有文献［2，3］报道可用紫外分光光度法测定乙酰螺旋霉素制剂的含量，但紫外分光光度法专属性差，测定结果误差较大。对乙酰螺旋霉素及其制剂的含量测定，中国药典2005年版［4］采用管碟法测定其效价，但管碟法操作繁杂、耗费时间慢长(需d2才能得到结果)，影响因素多，且需有经验的实验人员才能得到理想的结果，同时由于乙酰螺旋霉素是多组分，容易导致双圈现象，使重现性差。比浊法是一种快速、方便、经济的测定抗生素含量的方法，中国药典2005年版微生物检定法新增浊度法测定庆大霉素效价［5］。国内正在研制微生物比浊法测定仪，我们应用该测定仪在线自动测定乙酰螺旋霉素效价，减少了多种实验影响因素，节省了大量人力劳动，4h即可得到实验结果。 1 仪器与试剂 1.1 仪器 TU1901紫外分光光度计，北京普析通用公司；CZB抗生素光度测量仪，北京潮声公司；WBS微生物比浊法测定仪与ZY多功能微生物自动测量分析仪均是北京先驱威锋技术开发公司生产；BP天平，Mettler公司。1.2 菌株、样品、培养基与试剂 金葡菌(Staphylococcus aureus)CMCC(B)26003、大肠埃希菌(Escherichia coli) CMCC(B)44103与肺炎克雷伯菌(Klebosiella pneumoniae)CMCC(B)46117均由中国药品生物制品检定所提供。 乙酰螺旋霉素标准品(批号130347，效价1315μg/ml)由中国药品生物制品检定所提供。乙酰螺旋霉素片(批号060511590、060610220，规格0.1g)为河南天方药业股份有限公司生产；乙酰螺旋霉素片(批号010060602，规格0.1g)为石药集团药业有限责任公司生产。 营养琼脂培养基(批与抗生素检定培养基III(批号060211)均为北京奥博星生物技术有限责任公司生产；0.9%氯化钠溶液和磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)均按中国药典2005年版二部附录［5］配制。 2 效价测定 2.1 管碟法 按中国药典2005年版二部方法［4］测定。 2.2 比浊法 (1)含菌培养基的配制 取金葡菌新鲜斜面培养物，接种于营养琼脂培养基小斜面上，置35～37℃培养18～20h，用0.9%氯化钠溶液洗下菌苔，并用0.9%氯化钠溶液稀释，使其在650nm波长处的吸光度约为1.0