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瘦素及其受体在椎间盘组织的表达及意义_医学论文
瘦素及其受体在椎间盘组织的表达及意义_医学论文
【摘要】 目的 探讨瘦素及其受体在椎间盘组织表达及意义。方法 采用免疫组织化学技术检测正常椎间盘(21个)与退变椎间盘(39个)组织中瘦素及其受体的表达,用免疫细胞化学技术检测体外培养的纤维环细胞中瘦素及其受体的表达。结果 退变椎间盘组织中瘦素及其受体的表达高于正常椎间盘组织,差异有显著性(t=3.223、5.553,0.05)。体外培养的纤维环细胞中可以检测到瘦素及其受体表达。结论 椎间盘组织存在瘦素及其受体瘦素可能在椎间盘退变中发挥作用。
【关键词】 瘦素椎间盘免疫组织化学
[ABSTRACT] Objective To study the expressions and their significance of leptin and leptin receptor in intervertebral disc. Methods Expressions of leptin and its receptor protein were detected in 21 normal intervertebral discs and 39 degenerative discs, and in human cells of annular fibrosus cultured in vitro, immunohistochemically and immunocytochemically, respectively. ResultsThe expressions of leptin and its receptor in degenerative discs were stronger than that of the normal discs (t=3.223,5.5530.05), and that expressions could also be determined in the cells cultured in vitro. Conclusion Leptin and leptin receptor exist in the intervertebral disc tissue, which might play an important role in the process of the disc degeneration.
[KEY WORDS] leptin intervertebral disc immunohistochemistry
瘦素是肥胖基因编码的肽类激素,体内许多组织中有瘦素及其受体的表达。瘦素具有很多重要的生理作用,包括调节食欲、控制体质量、调节机体炎性反应和免疫功能及促细胞增殖等[1]。瘦素在肥胖的发生过程中扮演重要的角色。同时,研究证明肥胖也是椎间盘蜕变的重要危险因素。椎间盘退变与骨性关节炎发病过程极为相似,其机制除了传统的生物力学因素外,目前研究较多的生物化学因素可能也起着比较重要的作用。现已证明关节软骨细胞可以表达瘦素及其受体,并且瘦素可以刺激软骨细胞的体外增殖,通过促进骨赘形成参与骨性关节炎的发病过程[2],而瘦素在椎间盘退变过程中的作用报道很少。本实验旨在探讨瘦素系统在椎间盘中的表达及其在椎间盘退变发生发展中的作用。
1 材料与方法
1.1 标本及其来源
腰椎间盘标本60个,L3,4椎间盘6个,L4,5椎间盘31个,L5S1椎间盘23个。均来自于青岛大学医学院附属医院2008年4月—2009年1月因腰椎间盘突出症、腰椎外伤爆裂骨折经手术治疗的病人。所有病人均知情同意。病人中男27例,女24例年龄21~59岁,平均41岁。所有病人术前均未行过硬膜外封闭、化学溶核及经皮穿刺髓核切吸术。所取标本包括纤维环和髓核。正常组21个,纳入标准为:①术前MRI显示所取的椎间盘组织T2加权像上Pfirrmann分级Ⅰ~Ⅲ级②术前无神经根刺激症状。退变组39个,纳入标准为:①术前MRI显示所取的椎间盘组织T2加权像Pfirrmann 分级Ⅳ~Ⅴ级②术前存在明显神经根刺激症状。各标本取出后置于40 g/L甲醛溶液中固定,Carnoy 液4 ℃过夜,不同梯度的乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋。4~5 μm厚连续切片,以备苏木精伊红染色和免疫组化检测用。
1.2 方法
1.2.1 切片光镜观察 用苏木精伊红常规染色。
1.2.2 免疫组织化学染色 瘦素兔抗人多克隆抗体和瘦素受体羊抗人多克隆抗体购自Santa Cruze公司Immunostain SP Kit试剂盒和DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。载玻片均经多聚赖氨酸浸泡24 h防脱片处理,60 ℃烤箱
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