细菌拉丝试验(刘海林).pptVIP

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应用 主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应,有的则需30~45s,假单胞菌、无色杆菌、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性,不动杆菌、莫拉菌反应较慢,大多数菌株在60s内出现阳性,而革兰阳性菌在60s以后仍为阴性。 试验材料 4%KOH溶液,接种棒,载玻片,已培养好的细菌菌落,等。 方法 取1滴40g/L氢氧化钾水溶液(应新鲜配制)于洁净玻片上,取新鲜菌落少许,与氢氧化钾水溶液搅拌混匀,并每隔几秒钟上提接种环,观察能否拉出粘丝。 或用接种环蘸取少量KOH溶液与单个细菌菌落混匀,在平皿中进行拉丝试验,方法同上。 结果 用接种环拉出粘丝者为阳性,仍为混悬液者为阴性。 注意事项 试验一般使用3-5%KOH%较好,常用4%比较方便 。 KOH量不能太多,菌量不能太少,尤其不动杆菌,4%KOH要少一点,菌要多一点,否则易导致阴性。 如果载破片上滴加的KOH液体过多,可将菌落拉到液体较少的边缘进行拉丝试验。 刘海林 拉丝试验原理 革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂,释放出未断裂的DNA螺旋,使氢氧化钾菌悬液呈现粘性,可用接种环搅拌后拉出粘丝来,而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。 方法1、挑取少量细菌菌落在载玻片上试验阳性结果 方法2、蘸取少量KOH与单个菌落混匀 方法2、拉丝试验阳性 结果

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