注射用鼠抗人T淋巴细胞CD25单克隆抗体(WuTac)药效学检测方法学的研究.pdfVIP

注射用鼠抗人T淋巴细胞CD25单克隆抗体 (WuTac)药效学检测方法学的研究 孙可芳，杜雯，张园，郭长福，张爱华 (武汉生物制品研究所，武汉430060) 摘要：目的摸索与建立鼠抗人T淋巴细胞CD25单克隆抗体(WuTac)与白细胞介素2受体(IL-2R)结合的饱和 程度的检测方法，评价注射用WuTac单克隆抗体临床应用的有效性。方法采用体外与体内的实验方法，对健康 志愿者与肾移植病人应用不同剂量的WuTac单抗，采用直接或间接免疫荧光法，通过流式细胞术检测IL-2R饱和 度，并与国外同类产品进行比较。结果WuTac单抗与Zenapax和2A3单抗具有相似或相同的抗原位点，而与Si— malect以及7G7单抗的抗原位点不同。不同剂量组的健康志愿者静脉单次给药，给药后lhWuTac均能饱和T细 胞上IL-2R的相应位点，饱和度均在96％以上，并可维持饱和状态至少3天。肾移植志愿者术后第一天IL-2Ra饱 和度升至75．53％，至术后第1Q天升至最高96．49％，到术后21天仍维持较高水平，到术后28天为56．19％。结 论WuTac在人体内对IL-2受体的亲合力高、作用迅速，而且其半衰期长，WuTac对IL-2R的封闭作用明显。 WuTac结合IL-2R的饱和度测定，是评价注射用WuTac单克隆抗体有效性的重要指标之一，可用于Ⅱ、Ⅲ期的临床 研究。 关键词：流式细胞术；单克隆抗体；白细胞介素2；IL-2R饱和度；免疫抑制剂；抗CD25单克隆抗体 注射用鼠抗人T淋巴细胞CD25抗原单克隆抗 摸索并建立了WuTac药效学的实验室以及临床评 体(WuTac)为肾脏移植急性排斥反应的治疗和预防价的监测方法。 新药，属《药品注册管理办法》注册分类中治疗用生 材料与方法 物制品Ⅱ类，是一种鼠抗人白细胞介素2受体的单 克隆抗体，能特异性的作用于激活的T细胞IL-2受1试剂及仪器 体俚链，通过竞争性的与IL-2R结合，拮抗IL-2与人源化CD25单抗Zenapax为罗氏公司产品； 其受体结合所介导的T细胞增殖，并且能使活化的 T细胞表面IL-2R表达下调，抑制IL-2诱导的T细 胞增生，从而抑制、调节T细胞功能，发挥免疫调节 作用。 IgG、T细胞亚群检测试剂盒以及含抗凝剂的采血试 研究表明：急性排斥反应的发生与T淋巴细胞 激活有关，传统的免疫抑制剂主要是减少IL-2的合 成与分泌，而对IL-2与其IL-2R的结合并无阻断作 FACSoft 用¨，2J。CD25为IL-2受体的o【亚单位，是参与T淋汉生物制品研究所制备；流式细胞仪BD 巴细胞激活的主要组分。由T细胞介导的特异性 为BD公司产品。 免疫反应可以被抗CD25单克隆抗体所抑制。目前2实验方法 在美国等国家，针对CD25的单抗制剂，如Zenapax@首先采用间接免疫荧光法的竞争抑制试验，将 和Simulect@，均源于鼠IgG类，已在临床器官移植WuTac单克隆抗体，与国外同类的抗CD25的单克 领域开始应用，疗效和安全性得到了充分的肯定，并 隆抗体进行比较，经过筛选与比较试验，选择出与 于2000年开始在我国推广口。’。WuTac将主要用 于预防和治疗器官移植中的急性排斥反应，目前已 WuTac具有相同或相似位点的抗CD25的单抗。在 经进行I期临床研究工作。为了评价注射用WuTac此基础上，我们再采用直接免疫荧光法，检测志愿者 单克隆抗体临床应用的有效性，我们除了观察其临 外周血淋巴细胞中CD25细胞的百分数，再根据 床应用后，是否能够降低器官移植术后的急性排斥 发生率外，还需要建立实验室监测指标，为此，我们 ．369· 药后的1、24、72h肘静脉采血，加人含抗凝剂的采血 者(用药后7G7一用药后7矿uTac)／用药后