絮凝法去除谷氨酸等电上清液中菌体蛋白的研究.pdfVIP

絮凝法去除谷氨酸等电上清液中 菌体蛋白的研究 孙小丁 曹伟锋 计立杰 刘树涛 山东阜丰发酵有限公司 【摘要】本文针对谷氨酸生产过程中各种料液(发酵液、等电上清液或离交高流液等)的特性，选 择等电上清液为研究对象，以聚丙烯酸钠为絮凝剂去除其菌体蛋白，通过对菌体蛋白絮凝及其絮凝条件选 择的研究，获得了82．3名的菌体蛋白去除率和96．68％酗／谷氨酸回收率。 【关键词】谷氨酸；等电上清液；絮凝；菌体蛋白；聚丙烯酸钠 谷氨酸发酵液中含有菌体蛋白和其它胶状物 钠作絮凝剂处理谷氨酸料液，对絮凝料液的筛选、 等杂质，这些杂质的存在影响谷氨酸的质量和提取 絮凝条件选择等方面作了研究，并获得了较高的菌 率，也为后段工序的生产增加了困难。国外在谷氨 体蛋白去除率及谷氨酸收率。 酸提取前通过预处理除去这些杂质。国内也有这方 1、材料和方法 面的报道，主要的方法是高速离心和加热沉淀。由 1．1材料与试剂 于前者能耗大，后者效果较差，都得不到推广应用。 谷氨酸发酵液、谷氨酸等电上清液、谷氨酸离 另外，膜分离技术也在不断发展应用中，虽然其能 交高流液，由宝鸡阜丰科技有限公司提供；其它试 取得较好的效果，但由于使用成本较高而很少在大 剂为自购分析纯 规模生产上连续使用。因此，絮凝法去除菌体蛋白 1．2仪器 的方法还是比较经济实用的方法。 电磁搅拌调温电热套，SBA-40C生物传感仪 聚丙烯酸钠是水溶性天然高分子物质，由于分 (山东省科学院)、PB一10精密PH计(赛多利斯)、 子中含有大量的胺基对蛋白质和其它胶体物质具 有很强的絮凝作用，可以作为阴离子絮凝剂使用。 (上海)、电磁搅拌器(江苏)、722．S分光光度计 聚丙烯酸钠作为最常使用的絮凝剂，价格低廉，效 (上海)、高速离心机(上海)、101—2电热鼓风干 果稳定，是一种更为合理的选择。本文以聚丙烯酸 燥箱(天津)、干燥器及称量瓶等。 ·83· 2007年全国发酵行业高峰论坛 1．3分析方法 含量)，g／L 1．3．1谷氨酸含量分析：生物传感分析仪法 1．3．2pH测定：PB．10精密PH计 (m0×c0) 1．3．3透光：722分光光度计，590rim下测定透 式中，mO一絮凝前清液质量，g 光值【5】 ml——絮凝后清液质量，g 1．3．4 RG残糖测定：斐林试剂法 m2_滤饼洗液质量，g 1．3．5含菌量测定：发酵液和经絮凝后的上清 cO一絮凝前清液的谷氨酸含量，g 液分别放入离心机中以6000rpm离心分离10分钟，c1——絮凝后清液的谷氨酸含量，g 倾出上清液，留下沉淀物，再用无水酒精洗涤二次， c2一滤饼洗液的谷氨酸含量，g 离心、分离，倾出上清液，留下沉淀物，干燥、恒 2、结果和讨论 重、称量得出湿菌体含量。 2．1絮凝对象的选择 1．3．6菌体蛋白去除率：F=(G—G1)，G×根据本公司谷氨酸生产的现有工艺，如果能够 100％ 在谷氨酸生产的中期或中后期去除料液中的菌体 式中，G—一发酵液中菌体含量(湿重含量或 蛋白，这将会给后提取工序减轻很大压力。因此， 干重含量)，ga,