三孢布拉氏霉的电镜研究①.pdfVIP

电子显微学报 J．Chin．Eleetr．Microsc．Soc 17(2)l109~113 1998年 1O9 三孢布拉氏霉的扫描电镜研究① 陈 涛 里塞盟竺 陈宗胜 童 骁 马国华 朱湘民 (中国科学院武汉病毒研究所，武汉 430071) l } 姜文侯 单志萍 孟 好 孙冬梅 (江苏省微生物研究所，无锡 214063) A 摘 要 末文用扫描电镜研究了三袍布拉氏霉的形态发生。试菌正椿和负椿在无性繁殖中都形成大 抱子量和小抱子量。正椿的小抱子量有单抱和多抱之分，而 负椿的仅见多抱 末文对接舍抱子的观察 4-a~~-t 关蕾词三丝互垫白兰盎业王土——塾塞垂接合抱子 ．‘豫／。a／ 自1914年Thaxter“发现三孢布拉氏霉以来，有关它的形态及其发生已有报遣0 ，值多用 光学显微镜和人工绘图法得到图像，其立体感差，分辨率低或不直观，对该苗深入研究和开发利 用有一定的影响。因此，本文用扫描电镜对该菌正、负株的无性繁殖和有性繁殖的形态发生和精 细结构进行了研究。现将材料和方法结果报道如下。 材料和方法 1．菌种 所用菌种三孢布拉氏霉引自ATCC，编号为正株 14059，负株为 14060。 2．单株培养 将正、负株分别接种到PDA培养基上，26℃培养2天长出大量黑褐色孢子囊。用无菌水制成 孢子悬浮液，滴加在平铺于PDA培养基上的玻璃纸表面。用无菌玻璃刮铲涂匀后，26℃培养 1～ 2天剪取带有菌落的小块玻璃纸用于电镜制样 。 3．接合孢子的培养 将正、负株的苗丝分别接种到铺有玻璃纸的PDA培养基的两侧，26℃培养2～4天皿中部偏 向负侏的玻璃纸下方形成由丛生的接合孢子组成的黑带。揭掉玻璃纸，取出表面有接合孢子的培 养基用于电镜制样。 4．扫描电镜样品的制备和观察 将培养的各种样品用2．5 戊二醛固定后，用PBS缓冲液洗三次，每次15rain再经四氧化锇 固定和PBS缓冲液洗三次。梯度脱水，临界点干燥和离子溅射制片。在AMRAY一1000B扫描电 镜、30kV下观察、拍照。 结 果 1．无性繁殖 三孢布拉氏霉的正、负株的无性繁殖基本相同。孢子先萌发形成芽管，芽管延伸并大量分枝 来稿 日期一1996年 5月2o日．修改稿收到 日期 1997年 5月 16日 ①国家生物技术攻关专题 85=722—14-06资助项 目 @卫文忡 ：武汉大学丸 级车科实习生 l p 电子显微学报 J．Chin．Electr．Microsc．Soc 110 17(2)t109~113 1998年 逐步形成营养菌丝、气生菌丝和孢囊梗，孢囊梗头部发育形成大孢子囊和小孢子囊。 (1)大孢子囊 正、负株的大孢子囊卵圆形或球形，大小为(51．1～59．6)×(44．1～43．4)m；单生在透明无 色、直立或弯曲成点头状、简单不分枝的孢囊梗的顶端 (图版 I--1，3)。大孢子囊成熟后，其壁薄 而透明，表面有许多微小斑点并破裂成两半，释放出孢囊孢子 (图版 I--2，4)。 (2)小孢子囊 小孢子囊的孢囊梗直立、不分枝或双叉状分枝数次，有节状突起 ，顶端直接膨大形成泡囊。小 孢子囊生长在泡囊表面的小梗上，并以一个小球体与泡囊相连 (图版 I--5，6，7，8)。小孢子囊成 熟后，常和小球体作为一个整体从泡囊上脱落下来(图版 I--9，10)。 正、负株的小孢子囊的形态有差异。正株的小孢子囊有两种结构 ：其一为多孢的小孢子囊，即 一 个小球体上仅联结一个小孢子囊，桔形或扁球形，大小为(11．8～12．7)×(9．2～9．7)~／m，内含 三个(也含 2—6个)孢囊孢子 (图版 I--5)}其二为单孢的小孢子囊，即一个小球体上联结形态相 近的三个孢囊孢子，长椭圆形，大小为(13．0～13．6)×(6．3～6．7)~Lra，内含一个