去胚轴对花生子叶肽链内切酶和贮藏蛋白质降解的影响.pdfVIP

植物生理学报 , Act a Phytophysiologica Sinica 　2000 , 26( 6) :465～470 465 去胚轴对花生子叶肽链内切酶和贮藏蛋白质降解的影响 宾金华1 　傅家瑞2 ( 1华南师范大学生物系 , 广州 5 1063 1 ; 2中山大学生物系 ,广州 5 10275) 摘要 : 从离体子叶与连体子叶在水中培养一段时间后 两片子叶分别培养 , 按规定天数取出子叶保存于 的比较 ,看到它们之间在肽链内切酶活性和盐溶蛋白 - 80 ℃中备用 。一片子叶用于酶活性测定 ,另一片 及花生球蛋白降解上的差异并不大 ,这表明去除胚轴 ( 子叶用于贮藏蛋白质测定 。亚胺环己酮 cyclohex 对子叶肽链 内切酶活性和贮藏蛋 白降解的影响很轻 imide ,CHM) 为 Sigma 产品 ,用蒸馏水配制成所需 ( ) 微 。亚胺环己酮 蛋白质合成抑制剂 不能完全抑制离 体子叶肽链内切酶活性的提高 , 子叶的大部分大分子 浓度 ,加入培养皿中培养子叶 ,培养条件和操作步 贮藏蛋白同样被降解 。这表明 ,在花生种子萌发过程 骤均同上 。 中降解大部分贮藏蛋白的子叶肽链内切酶并非全部是 1. 2 　蛋白质提取和测定 在种子萌发时新合成的 ,子叶贮藏蛋白降解和肽链 内 ( ) 蛋白质提取按照 Yamada 等 1980 及黄上志 切酶活性基本不受胚轴调控 ,子叶与胚轴之间在调控 ( ) 和傅家瑞 1992 的方法进行 。蛋白质含量测定按 关系上可能是一种新的调节类型 。 Bradfor d ( 1976) 的方法进行 , 以牛血清蛋白作标准 关键词 : 花生 , 离体子叶 , 肽链 内切酶 , 贮藏蛋 白降 曲线 。SD SPA GE 按照 L aemmi ( 1970) 及黄上志和 ( ) 解 , 亚胺环己酮 傅家瑞 1992 的方法进行 。 学科分类号 : Q945 1. 3 　肽链内切酶提取和活性测定 ( ) β 取子叶按 1 5∶W/ V 加入预冷含 巯基乙醇 　　肽链内切酶在萌发种子的贮藏蛋白质降解中 μ ( ) 10 mol/ L 的磷酸缓冲液 p H 7