商陆毛状根的诱导、培养及其皂甙的产生.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! ’( ) ! *’ ) ! 年 月 #$$% ! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,-.,/0 #$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 商陆毛状根的诱导、培养及其皂甙的产生 施和平 梁 朋 权 宏 （华南师范大学生命科学学院， 广州） 7!$6%! 摘 要 发根农杆菌（ ） 感染商陆叶片外植体 周后，在其切口处产生毛状根， 后产 31*(4+0/%*#)5 *#6(1%$% D!6$! ! #$C 生毛状根的外植体比例达2$ E ；毛状根可直接从叶片外植体叶脉处或从叶脉处产生的愈伤组织上产生。毛状根能 在无激素的FG 培养基上自主生长，其呼吸速率比对照根提高57 )6 E 。冠瘿碱检测和HID 扩增结果表明，发根农 杆菌 的冠瘿碱合成酶基因及其 质粒的 基因均已在商陆毛状根基因组中得到表达。毛状根中总皂 D=31J*K D= *(, 甙含量约为自然根的!)78 倍，但其多糖含量则仅为非转化根的2$ E 。 关键词 发根农杆菌；商陆；毛状根；呼吸速率；总皂甙 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） L5!% K !$$$1%$6! #$$% $!1$$861$8 发根农杆菌（ ）侵染植物 外植体制备 31*(4+0/%*#)5 *#6(1%$% !# ［ ］ 后，它所含的 质粒的 片段在植物细胞基 !! D= 31J*K 按我们已发表的方法 ，获得商陆无菌苗。取 ［，］ 因组中整合和表达，形成毛状根! # 。利用生长迅 无菌苗的幼叶切成具叶柄或叶脉的 # 叶块， $ )7 B 速、次生代谢物产率高而稳定的毛状根培养物来生 并置于无激素的FG 培养基上预培养#8 ? 后用于转 ［ ］ % M 6 产药用植物的次生物质，已有不少报道 。但利 化。 用发根农杆菌对商陆（ 毛状根的诱导和培养 72/(,+00+ %0),%$/+ N,- !$ O’.PP4）的遗传转化，以毛