多功能接触镜护理液对溶菌酶活性的影响.pdfVIP

多功能接触镜护理液对溶菌酶活性的影响 1 1 1，2 孔晓牧 ，李荷楠 ，王月丹 1 北京大学医学部基础医学院免疫学系，（100083） 2 北京大学医学部生物医学实验教学中心病原与免疫综合实验室，（100083） email: immunology@ 摘 要：研究表明，近期发生在新加坡和香港等地的角膜真菌感染发病率升高可能与多功能接 触镜护理液对角膜免疫微环境的改变有关，作为角膜免疫微环境的重要组成部分，溶菌酶在其 中的作用是本研究的主要内容。本研究采用琼脂平板扩散法探索多功能接触镜护理液对于溶菌 酶活性的影响进行研究。结果表明，护理液本身对溶壁微球菌没有杀灭作用，同时护理液对于 溶菌酶的活性没有明显的抑制作用，而且护理液可以促进溶菌酶发挥更好的杀菌作用。鉴此， 多功能接触镜护理液引起角膜免疫微环境的改变并增加眼部对于真菌的易感性可能与其影响溶 菌酶的作用无关。 关键词：接触镜护理液； 溶菌酶；琼脂平板扩散法；免疫 1. 引言 随着佩戴接触镜的人越来越多，接触镜护理液的使用也越来越普及，其中多功能接触镜护 理液更以其集清洁、消毒和去蛋白于一身的优越功能受到广大佩戴人群的青睐。今年2月，新加 坡、香港等地相继发生了与使用多功能接触镜护理液相关的真菌性角膜炎的事件，有关人士认 为这种疾病的发生与护理液引发的真菌耐药性增强或变异有关。但是，多功能接触镜护理液也 有可能是通过改变人角膜免疫微环境而引起角膜对真菌易感性增强，有研究表明，多功能护理 液可以显著地抑制或降低补体对靶细胞的杀伤作用。 泪液是角膜免疫微环境的重要组成部分，溶菌酶（lysozyme ）是泪液中一种主要的蛋白成 分，含量约占泪液总蛋白含量的1/3。溶菌酶是一种15kDa的小分子蛋白质，具有杀菌作用，可 以通过水解细菌胞壁质中的Ｎ-乙酰胞壁酸和Ｎ-乙酰葡萄糖胺中的β-1，4糖苷键[1]，直接溶解多 + - 种革兰氏阳性(G )菌的细胞壁。而有些革兰氏阴性(G )菌在抗体存在、细胞壁发生破坏时，也可 [2] 以被溶菌酶溶解 。 [3] 目前，市场上的接触镜护理液的除蛋白功能大部分是基于去除溶菌酶而设计的 。接触镜 护理液可以有效去除镜片表面的溶菌酶 [4] ，那么，接触镜护理液也可能会对泪液中的溶菌酶具 有一定的作用。有文献显示，溶菌酶在镜片表面发生变性与护理液成分有关[3] 。在此，我们对 多功能接触镜护理液对溶菌酶活性的影响进行了研究与讨论。 2. 材料和方法 2.1 试验菌种。溶壁微球菌（M.Lysodeikticus ）购自中国科学院微生物研究所，菌种编号1.634。 1 2.2 培养基及多功能接触镜护理液。增菌用液体培养基：蛋白胨 10g/L ，牛肉粉 3 g/L ，NaCl 5 g/L，蒸馏水配制，调pH至 7.0，121℃高温高压灭菌20min 。增菌用平板培养基：蛋白胨 10 g/L ， 牛肉粉 3 g/L ，NaCl 5 g/L ，琼脂粉 15 g/L ，蒸馏水配制，调pH至 7.0，121℃高温高压灭菌20min 。 平板检测培养基：葡萄糖 5 g/L ，蛋白胨 5 g/L ，牛肉膏 3 g/L ，NaCl 5 g/L ，琼脂粉 8 g/L ，蒸 馏水配制，调pH至 6.5，121℃高温高压灭菌 20min[5] 。多功能接触镜护理液：北京博士伦眼睛 护理用品公司产品——ReNu ，购自北京大明城眼镜有限公司。 2.3 试验菌的培养及获得。将溶壁微球菌置于增菌用液体培养基中，28 ℃温箱中恒温培养24h ， 继代一次，以激活冷冻干燥的菌。继而将继代菌接种于增菌用平板培养基上，置于28 ℃温箱中 恒温