大麦试管受精的研究.pdfVIP

。 8 -- ， 一 4 1994 大麦试管受精的研究 S 3 ／ 赵章杏 徐 阿炳 朱睦元 (杭州大学生物科学与技术未 310012) _ — _ — 一 - — — — — — 一 摘要：我们对大麦进行 了试管受精的研究．二倍体大麦品种问的试管受精结实率高达 81．8 ·二倍体和 四倍体大麦品种问、二倍体大麦与磋垃小麦属问，四倍体大麦与硬垃小麦属同厦二倍体大麦与黑麦属问的试 管受精结实率分别为 6．7 、15．4 、6．7 霸 5．1 ．从试管种子得到了幼苗 ，其中二倍体大麦品种问的杂种 苗长成檀抹并结实． 大麦是 自花授粉的植物，其受精作用就是 消毒，然后在超净工作台上用 0．1％升汞溶液 同一颖花的花粉落在雌蕊的柱头上．花粉粒在 浸泡消毒 3—5分钟 ，再用无菌蒸馏 水冲洗三 拄头上萌发生长出花粉管 ．花粉管由花柱进入 次，在灯距约为3O厘米的 15瓦紫外灯下照射 子房伸向珠孔 ，由珠孔进入珠心，最后到达胚 2O分钟后剪去两侧退化小襁 ，去雄，套上无菌 囊．此时，花粉管的末端膨胀破裂．释放出两个 玻璃纸袋，插入盛水三角烧瓶中培养两天 ，以 精子，其中一个精子和卵细胞结合成合子，以 待雌蕊成熟进行授粉． 后发育成珏，另一个精子跟两个极核结合，产 接种当天上午，在 田问选职花药呈黄色而 生一个三倍体核 ，以后发育成胚乳，其受精过 未开裂的父丰麦穗 ，用挤千的 70 酒精棉球 程的特点是双重受精． 攘去尘土污物和表面初步消毒t在超净工作台 自Kanta等人 1962年首次报道罂粟胚珠 上用 15瓦紫外灯照射 20分钟．接着立即对去 试管受精获得成功后，试管受精作为一种新技 雄的母本麦穗进行授粉 ，授粉的大麦小穗植入 术，使人们能够把植物的受精过程完全置亍可 装有改 良MS培养基 (蔗糖 5 ，琼脂 0．8 ， 以控制的人工条俘之下，为进一步控制受精过 PH值调到 5．8，分装入试管后在 15磅 ／时 下 程，克服远缘杂交的不亲和性 ，研究特异基因 热压消毒 15分钟)的试督中在 25．C左右的培 的有性转移开辟了新路子 ．这使人们注意到应 养室 内进行培养．设未授粉的子房为对照 ，试 用这种技术于禾谷类作物的遗传与育种研究 管受精的杂交组合详见表 1和表 2． 上的重大潜力． I = 、结果和讨论 大麦的试管受精是指大麦的离体受精，它 1、大麦雌蕊离体受精后的籽粒发育 包括雌蕊的离体授粉和胚珠的试管受精．雌蕊 雌蕊离体授粉后，不论二倍体大麦 品种 的离体授粉就是将雌蕊进行离体培养，在试管 间、不同倍性大麦的品种间杂交，还是二倍体 里对其授粉，最后得到含有能育种子肥果宴． 大麦和硬粒小麦属间、四倍体大麦与硬粒小麦 雌蕊的离体授粉先后在烟草、玉米 、小麦和水 属间及二倍体大麦与黑麦属间的杂交 ，籽粒发 稻等农作物上获得成功．我们对大麦雌蕊的离 育的特点基本相似。授粉后 2—3天，子房 明显 体授粉的研究，自1989年以来，做了许多试验 膨大，受精的子房 4—7天可长成半个颖果 ，其 工作 ，现将研究结果报告如下 ： 裸露的种皮和 内外稃均呈绿色 ，第 1O—l6天 一 、 材料和方法 可发育成完整的颖果．随着颖果的灌浆充实， 1、材料 其顶端呈弓形弯曲．授粉后 20天左右 。颖果颜 二倍体大麦有早熟3号和小将二个品种， 色 由绿色转变为黄色 ，约一个月时间，颖果黄 它们的性状差异明显；四倍体大麦有早熟 3号 熟． 和 8091I硬粒小麦有硬粒小麦 75和硬粒小麦 试管授粉后 15天的颖果发育可分成三种 420；黑麦为荆州黑麦． 类型；子房体积的增大