微生物原生质体融合技术研究进展.pdfVIP

动物医学进展 ,2008 ,29 (5) :6467 Pro gre ss in Vet erinary Medicine 微生物原生质体融合技术研究进展 1 ,2 1 1 1 1 ,2 1 王春平 ,韦 　强 ,鲍国连 ,刘 　燕 ,邵泽香 ,季权安 ( 1. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所 ,浙江杭州 3 1002 1 ; 2 . 山东农业大学动物科技学院 , 山东泰安 27 10 18) 　　摘 　要 :原生质体融合技术在遗传学 、动植物远缘杂交育种 、生物学 、免疫学 、兽医学以及医药 、食品、农 业等方面都有广泛的应用价值 ,文章就原生质体制备 、再生及其融合过程中的影响因素做了综述 ,另外还对 原生质体融合方法和融合子的筛选方法进行了比较 ,为选择适宜有效的诱导融合方法和筛选方法提供依据 。 　　关键词 :原生质体融合 ;影响因素 ;融合方法 ;筛选方法 ( ) 中图分类号 :Q813 . 2 文献标识码 :A 文章编号 2008 　　原生质体融合也称细胞杂交 、细胞融合或体细 为 5 ∶3 ∶1 的酶液混合使用能提高去壁效果 。使用 胞杂交 ,是指细胞通过介导和培养 ,在离体条件下用 微生物产生的酶复合物或商品酶的混合液比单独使 人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合成一个 用一种酶的效果好 ,在一定范围内,酶作用的时间和 核或多核的杂合细胞的过程[ 1] 。原生质体融合技术 酶作用的浓度都与原生质体的形成率成正相关 ,而 起源于 20 世纪 60 年代 。1960 年法国的 Kar ski 研 与再生率成反相关 。另外 , ED TA 作为螯合剂 ,可以 究小组在两种不同类型的动物细胞混合培养中发现 避免金属离子对酶的抑制作用而提高酶脱壁效果 , 了自发融合现象 。1974 年匈牙利 的 Ferenczy L 从而提高原生质体的形成率 。据报道 ,对大肠埃希 [2 ] 等 采用离心力诱导的方法 ,报道了白地霉营养缺 菌来说 ,用 ED TA 洗涤后 ,可以除去对酶解不利的 陷型突变株的原生质体融合 ,从而使原生质体融合 金属离子[7 ] 。另一方面 ,在原生质体制备前 ,用适量 技术成为微生物育种的一项新技术 ,并从微生物种 的青霉素对菌体进行预处理 ,可以抑制肽聚糖合成 [ 3 ] 内融合扩展到界间的融合 。路玲玲等 采用融合技 过程中的转肽作用 ,有利于原生质体的形成 。根据 术成功构建耐高温高产酒精酵母 ,至此 ,原生质体融 酶反应动力学原理 ,酶解温度直接影响酶促反应的 合技术成为工业菌株改良的重要手段之一 。原生质 速度 ,如放线菌的最适酶解温度为 28 ℃～37 ℃,真