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第 29 卷第 2 期 食 品 与 生 物 技 术 学 报 Vol . 29 　No . 2 　 　 　 　　　　 　 20 10 年 3 月 Journal of Food Science and Biotechnology 　 　 　　　　　 Mar . 　20 10 　文章编号 (20 10) ε 聚赖氨酸产生菌的筛选方法改进 李树1 ,2 , 　陈旭升1 ,2 , 　廖莉娟1 ,2 , 　张建华1 ,2 , 　毛忠贵 1 ,2 ( 1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 ,江苏 无锡 2 14 122 ; 2 . 江南大学 生物工程学院 ,江 苏 无锡 2 14 122) ε ( ε ) 摘 　要 : 改进了 聚赖氨酸 PL 产生菌的筛选方法 。在加有复合抑制剂的初筛平板上涂布土壤 悬液 ,于 30 ℃培养 7 d 后 ,将琼脂整体揭下 ,平铺到另一加有美兰的琼脂上 。挑取形成透明圈的 137 株菌进行摇瓶发酵 ,发酵液与 Dragen dorff 试剂和甲基橙反应 ,有 50 株呈阳性 。通过薄板层 析 ,确定有 42 株菌的产物含有赖氨酸聚合物 。通过水杨醛保护氨基的化学法对产物进行了酰胺 ε α ε 键连接方式的研究 ,确定了聚赖氨酸是由 N H 和 COO H 形成的 酰氨键聚合而成 。通过生理 2 生化特征和分子生物学鉴定 ,表明其中的一株菌为链霉菌属中的稠李链霉菌 S t rep tomy ces p a de n us ,其初始菌的摇瓶产量可达 08 g/ L 。 ε 关键词 : 聚赖氨酸 ;筛选 ;菌种鉴定 ; 16 s rDN A 中图分类号 : TQ 920 . 1 文献标识码 : A ε A Protocol f or Screening of Polylysine Producing Strains L I Shu1 ,2 , 　C H EN Xusheng1 ,2 , 　L IA O Lij uan1 ,2 , ZHAN G J ianhua1 ,2 , 　MA O Zhonggui 1 ,2 ( 1. Key L aboratory of Indu st rial Biot echnolo gy ,Mini st ry of Education ,J iangnan U niver sit y ,Wuxi 2 14 122 ,China ;2 . School of Biot echnology ,J iangnan U niver sit y ,Wuxi 2 14 122 ,China) ε Abstract :A novel polyly sine p ro duce st rain screen p rotocol wa s develop ed in t hi s st udy ba sed on ε t he chemical charact eri stics of p olyly sine . Throu gh t hi s t hreest ep s p rotoc