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持久性有机污染物论坛2007暨第二届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集
利用生物检测法CALUX⑧来检测饲料中的
二恶英类简易测定法
黄俊卿r,中村昌文1,村田弘司1,长谷川淳2 K.S.2,白井裕治3,山多利
Gumge
秋3,八木寿治3,森藤香3,山中典子2,宫崎茂2
(1株式会社日吉 日本国滋贺县近江八幡市北之庄町908番地千523.8555;2独立法人农研机
构 动物卫生研究所、日本国茨城县筑波市观音台3.1.5号亍305.0856;3独立法人(独)肥饲料检
查所、日本国墒玉县琦玉市中央区新都心2番1号=F330.9733;‘联系人,E.mail:
syunl(ei@hiyoshi.es.cojp) 、
1.引言
在日本饲料中经常添加鱼油来补助脂肪酸等营养的不足。而畜产品中的二恶英类(PCDDs_,Fs
类+Dioxin-LikePCBs类(以下称为DL.PCBs))的污染,几乎是饲料所引起的,所以对于饲料(鱼
油)中的二恶英类污染状况的监视与控制成为一项非常重要的工作。而在传统的分析方法中,往々
使用高分辩气相色谱质谱仪(HRGC/HRMS)来测定饲料中的二恶英类浓度。可是由于此方法的
前处理工艺极为复杂,加上整个分析费用非常高,所以在实施广范围及高频率的现况调查时,在
现实上利用此方法是较难以实现的。于是,更加简便及低廉的分析方法就更加被期待及开发了。
水化合物的受容体(AhR)结合,再测定荧光素酶的活性的一种简易测定方法。在本文中,我们
利用CALUX法来分析家畜饲料中的二恶英类浓度,再与标准法所规定的机器分析法
(HRGC/HRMS)进行了对比试验。
2.材料与方法
2.1饲料
采用2000年~2005年间在日本国所采取的饲料用鱼油(n=41)。
2.2 HRGC/IIRMS法的分析
HRGC/HRMS的分析方法是根据日本国农林水产省所颁发的f饲料中二恶英类的定量法暂定
指南J中所规定的方法来实施。首先在10克的鱼油里添加净化内标,在室温状态下进行硷分解2
小时之后,在利用正己烷进行提取。所获得的提取液再让它通过多层硅胶柱、活性炭柱进行净化、
mono—onho
2.3 CALUX法的分析
1)鱼油的前处理
取1克的鱼油,用正己烷溶解后通过硫酸硅胶柱等来进行净化,再让它通过活性炭柱将
124
持久性有机污染物论坛2007暨第二届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集
暴露与分析。
2)cht.ux法的暴露与分析
内上。经过20-24小时的培养后,饲料中所含有的二恶英类物质会激活荧光素酶的活性,再利用
荧光素酶的活性量与用标准液(2,3,7,8.TCDD)所做成的标准曲线相比对,即可获得毒性等量
(TEQ)浓度11J。
3.结果与讨论
3.1有关饲料中的二恶英类浓度
的WHO.TEF(2005)[2】所算出的数值也列出当作参考)。PCDDs/Fs类的平均浓度为
有的WHO—TEF(1995)相比,总体上来说TEQ浓度稍微偏低,其偏低的原因,明显的是
2,3,4,7,8.PeCDF和PCB#118所带来的影响。
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