钙相关蛋白在乳腺癌中与表达及与微钙化形成关系与研究.pdf

中文摘要 钙相关蛋白在乳腺癌中的表达及其与微钙化形成关系的研究 摘 要 目的：近年来，乳腺癌的发病率逐年上升。钼靶x线摄影检查作为 乳腺疾病诊断的首选方法，在乳腺癌的发现和诊断中发挥着重要作用，而 其中微钙化征象在早期癌特别是乳腺导管内癌的筛查中更具有重要价值。 资料显示，大约40％的乳腺癌在x线片中表现微钙化，90％的导管原位 癌是通过钼靶X线微钙化被发现的。因此，结合钳靶x线片中微钙化征 象，深入研究微钙化的形成机理、镜下病理特征表现及相关生物学特性， 对加深x线片中微钙化征象的认识，提高乳腺癌的诊治水平以及通过影 像学表现早期判断预后具有重要意义。 传统认为乳腺癌微钙化的形成是一个被动、退化的过程，主要由癌组 织坏死所致。最近研究显示某些异位钙化形成可能是一个主动的过程，很 多与骨化相关的蛋白和细胞因子可能参与了钙化形成。骨桥蛋白(osteo， 白，与骨组织的矿化有关。研究表明，0PN和ON可能参与了心血管系 统异位钙化及肾结石的形成。骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprot— 因子。乳腺癌微钙化属于组织异位钙化，因此，乳腺癌细胞也可能具有与 成骨细胞相似的生物学特性，通过相同的信号通路调控0PN、0N等骨基 质蛋白的表达，进而影响局部钙盐的沉积。 目前，有关钙相关蛋白与乳腺癌微钙化的关系及微钙化形成机制的研 OPN、0N的表达可能与乳腺癌微钙化形成有关。但是由于样本例数较少， 且缺乏微钙化形成机理的研究。为了进一步深入探讨乳腺癌组织中微钙化 的形成机制及临床意义，本研究依据钼靶x线片中微钙化表现分组，应 用免疫组化、流式细胞技术和R1二PCR等方法检测人乳腺癌组织中0PN、 ON和BMP一2的表达情况，分析其与微钙化和临床病理特征的关系；同 时应用连续切片HE染色、钙盐特染及透射电镜观察分析了乳腺癌微钙化 L 中文摘要 镜下病理形态学和超微结构表现；另外，通过体外细胞培养，研究了BMP．2 试图阐明乳腺癌细胞中骨生长调控因子BMP．2和骨基质蛋白OPN的关 系。 方法： 1乳腺癌组织中骨基质蛋白OPN、ON的表达及其临床意义 收集钼靶x线检查及临床资料齐全的乳腺癌组织标本61例。经4％ 多聚甲醛固定，石蜡包埋，常规HE染色，根据wHo肿瘤病理诊断标准 进行病理学诊断。由三位有经验的影像诊断医师阅片，根据钼靶片表现对 癌瘤微钙化征象及毛刺征进行描述和分组。并收集同时期门诊手术病理证 实的乳腺良性肿瘤29例做对照分析。应用sP免疫组织化学方法，检测 OPN、ON在乳腺癌组织中表达情况，分析其与影像学表现及临床病理特 征之间的关系。 2骨基质蛋白oPN、oN在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌微钙 化形成的关系 收集钼靶x线检查和临床资料齐全的乳腺癌病例93例。根据钼靶片 中微钙化的有无及多少，将病例分为多钙化组(大于20枚)、少钙化组(小 于20枚)和无钙化组。应用SP免疫组织化学方法，检测了0PN、ON在 各组乳腺癌中表达情况，分析了其与乳腺癌微钙化的关系。另外选取3 例钼靶片表现泥沙样微钙化病例及2例无微钙化表现病例进行微钙化连 续切片HE染色、、细Kossa氏银染和sP免疫组化病理形态学观察及透 射电镜超微结构观察。 30PN和ON mRNA在人乳腺癌组织中的表达及意义 收集乳腺癌组织30例，同时取距癌组织边缘5cm以上非癌正常乳腺 组织做对照。患者术前均行钼靶X线检查且临床病理资料齐全。应用半 水平，分析了其与微钙化表现和各临床病理特征的关系。 4BMP．2在乳腺癌组织中的表达及其与oPN、0N表达和微钙化的 关系 应用免疫组织化学SP法检测了6l例乳腺癌组织中骨生长因子 BMP一2的表达情况，结合钼靶x线表现和I临床病理资料，分析其与骨基 ／i 中文摘要 质蛋白0PN、0N表达的相关性及与乳腺癌微钙化的关系。 5 表达的影响 选用人乳腺癌细胞株MDA．MB一231细胞进行体外培养，用不同浓度 作用24、48、72小时。应用流式细胞术、免疫细胞化学