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硅酸二钙涂层离子溶出液促进成骨的体外细胞实验研究 中文摘要 硅酸二钙涂层离子溶出液促进成骨的体外细胞实验研究 中文摘要 第一部分硅酸二钙涂层在DMEM液中生物活性的研究 I摘要l目的通过DMEM培养液浸泡实验，观测硅酸二钙涂层表面形貌、元素组成 及培养液中主要离子浓度的变化情况，以了解硅酸二钙涂层在DMEM培养中的生物 活性。方法将硅酸二钙涂层试样浸泡于DMEM培养液内，37。C水浴，7天时过滤 除去晶体。带EDS的SEM观测涂层表面形貌及元素组成变化，ICP测定培养液中 Ca、P、Si离子的浓度变化。结果浸泡后涂层表面Ca、P元素含量增多，而Si元素 含量减少，并有含炭酸根的羟基磷灰石层(HCA层)形成；DMEM培养液中，Ca+、 Si+离子浓度较浸泡前均有显著的升高(Po．05)，P+离子浓度较浸泡前则显著的降低 好的生物活性；同时涂层溶出大量的Ca、Si离子，显著改变DMEM液的理化组成。 【关键词】硅酸二钙等离子喷涂生物活性 第二部分硅酸二钙涂层离子溶出液对体外培养成骨细胞生长及形态影 响的观察 I摘要】目的通过硅酸二钙涂层离子溶出液与成骨细胞复合培养，观察培养过程中 成骨细胞的形态学特征的变化，以了解硅酸二钙涂层离子溶出液对成骨细胞生长的影 响。方法将硅酸二钙涂层试样浸泡于DMEM培养液内，37℃水浴，7天时过滤除 去晶体，获得硅酸二钙涂层离子溶出液，ICP测定培养液中Ca、P、Si离子的浓度变 化情况。硅酸二钙涂层离子溶出液作为实验组，原始DMEM培养液作为对照组，分 别接种人MG63成骨细胞进行培养。倒置相差显微镜观察成骨细胞的生长形态变化： 台盼兰染色细胞计数法及MTT法进行活力细胞数比较。 结果 壁墼三堑鎏星塑三堕坐婆堡垄盛量盟竺丛塑望壅竺里!壅 !奎塑茎 著低于对照组(P0．05)。实验组细胞具有更早、更好的分化；实验组活力细胞数少 于对照组，但差异无显著性意义(p0．05)。结论硅酸二钙涂层离子溶出液具有促 进细胞分化的作用，这有利于骨的形成；涂层离子溶出液对活力细胞数的增加没有促 进作用，其原因及意义有待结合下部分实验结果综合分析讨论。 l关键词l硅酸二钙涂层成骨细胞形态学 第三部分硅酸二钙涂层离子溶出液对体外培养成骨细胞增殖周期及凋 亡的影响 [摘要]目的通过观察成骨细胞生长周期及凋亡的变化，试图阐明解硅酸二钙涂层 离子溶出液对成骨细胞增殖的影响。方法硅酸二钙涂层离子溶出液作为实验组，原 始DMEM培养液作为对照组，分别接种人MG63成骨细胞进行培养。流式细胞仪测定 3、6、12天时成骨细胞G1、S、G2期的百分比及细胞凋亡率；对细胞增殖活性指标SPF 验组Gl期细胞较对照组多，但差异无显著性(P0．05)，S期细胞显著少于对照组 PI值显著大于对照组(Po．01)。3一12天时，实验组细胞凋亡率大于对照组，并且在 子溶出物能缩短成骨细胞的生长周期、促进细胞增殖，其作用特点为：初期对成骨细 胞增殖稍有抑制作用，后期则显著刺激成骨细胞快速增殖。而实验组所表现的高细胞 凋亡率可能与其有更好的分化有关。 I关键词】硅酸二钙成骨细胞细胞周期细胞凋亡 Ⅱ 硅酸二钙涂层离子溶出液促进成骨的体外细胞实验研究 中文摘要 第四部分硅酸二钙涂层离子溶出液对体外培养成骨细胞分化及成骨表 型表达的影响 【摘要l目的通过测定成骨细胞分化及细胞表型特征性产物及基因的表达量，观察 硅酸二钙涂层离子溶出液对体外培养成骨细胞分化及成骨表型表达的影响，探讨硅酸 二钙涂层离子溶出液促进成骨的可能机制。方法硅酸二钙涂层离子溶出液作为实验 组，原始DMEM培养液作为对照组，分别接种人MG63成骨细胞进行培养。生化法 骨钙素(BGP)、成骨细胞特异转录因子(CBFA I)、类胰岛素样生长因子II(IGF．2) 等基因表达量的变化，并进行比较。结果 IGF．2及CBFA I基因表达量，3天时即显著大于对照组