冬枣树皮疱斑病病原菌分离与鉴定.pdfVIP

⑩CH阖INA植P铩LA哥NT叫PR2O0T08E~CT第IO-N期2·008V，o1．28N．o．II 臻 冬枣树皮疱斑病病原菌分离与鉴定冰 常慧红 ，金 莹 ，刘俊展 ，巴秀成 ，王小梦 (I．山东省滨州市植保站 ，山东 滨州 256618；2．山东出入境检验检疫局检验检疫技术 中心，山东 青岛 266002) 摘要 ：近年来在 山东省滨州市发生1种严重为害冬枣的新病害——冬枣树皮疱斑病(暂定名)。经2004～2007年在 山 东滨州市各县、区调查，从 16批次52个发病树皮分离获得242个分离物 ，经筛选、纯化和 回接试验 ，依照柯赫 氏法 则进行判断，确定树皮疱斑病是由PhomapersicaeSacc．(桃茎点霉菌)侵染造成。 关键词：冬枣；树皮疱斑病 ；病原物；分离鉴定 中图分类号：$436．65 文献标识码 ：B 文章编号：1672—6820(2008)11-0026—03 冬枣 (ZizyphusjujubaMillCV．dongzao)亦称雁 常规组织分离法 ，取病健交界处将病组织剪成 0．5 来红、苹果枣、冰糖枣等，为我国优 良的鲜食枣品种， 1．0cm 数块 ，于75％乙醇中浸泡 30S，然后移入 有着广阔的市场前景。据不完全统计 。仅鲁北地 区 0．1％升汞溶液中处理 1min，无菌水冲洗 3次，接种 (主要包括滨州、东营、德州市)现已发展冬枣 10万 于 PDA培养平板上 ．常规组织分离培养 。每个培养 hm 以上 ，已成为农 民致富的又一支柱产业 。近年 由 皿 内放 4—5个组织块 ．28℃恒温培养，7d后根据 于种植结构的调整和环境条件的变化 造成冬枣生 培养特征等，记载分离物的种类和数量。采用单孢 长期及采后病害发病率极高，严重制约了冬枣产业 分离法纯化分离的菌株 ，镜检各菌株培养性状、孢 的健康发展，已引起植物保护工作者的高度重视。笔 子形态等特征，初步鉴定到属或种。纯化菌株保存 者在对山东滨州市冬枣病害的调查中发现了 1种新 于 6cC冰箱内。 病害，该病主要为害冬枣枝干，显著影响树势，进而 1．3 回接菌株扩繁及致病性测定 影响冬枣的产量及品质。关于该病病原、病害的发生 1．3．1 孢子悬浮液的配制。将纯化菌株在培养基上 规律及防治研究国内外还未见相关的报道 ．笔者对 培养 7d后，加无菌水制成孢子悬浮液 。孢子悬浮 此病暂定名为冬枣树皮疱斑病．并对该病的病原种 液浓度为 lOx40倍 ．显微镜下每视野 30～40个孢 类、发生为害等进行了研究。 子。 1 材料与方法 1．3．2 田间回接试验。2006年5月 19El在滨州农 髯 1．1 冬枣树皮疱斑病发生为害情况调查 在滨州 业高科技示范 园选取 14棵未发病 4年生冬枣树 农业高科技示范园、沾化县黄升乡孙家村、滨州裕华 进行接种试验 ，每棵树在不同方位 2～3年生枝条 等冬枣园，依据方中达(1998)《植病研究方法》病害 上选取 3～4个点接种，共 53个接种部位 。采用4 调查方法，采取五点法取样 ，每点选择 10棵树，观察 种方法接种：①铁丝勒伤法。首先对接种部位进行 记载树皮疱斑病发病症状、发病率，确定其始发期和 酒精消毒，用消毒铁丝弯成环状制造勒痕 ，勒痕不 盛发期等。 宜过深 ，在勒痕上接种菌块 ；②刀割法。用灭菌刀 1．2 病原茵分离、纯化 供试分离样品采 自沾化县 片轻划消毒树皮表面制造伤El，直接接种菌块；③ 下洼镇、沾化县黄升乡、滨州裕华冬枣园、滨州农业 注射法 。用注射器将孢子悬浮液直接注射人表面 高科技示范园，共 16批次52个冬枣发病树皮。按 消毒的树皮内部；④无伤痕接种。将菌片直