IL-21重组载体的构建及其诱导T细胞活化增殖的研究.pdfVIP

虫垡I瞧 医 塞盔(电王版)2Q 车 9月第 8卷第 17期 ChinJClinicians(ElectronicEdition)，Seotember1．2014．Vo1．8．N · 基 础 论 著 · IL．21重组载体的构建及其诱导T细胞 活化增殖的研究 刘琳琳 【摘要】 目的 构建小鼠IL．21基因真核重组表达载体，为IL．21基因治疗肿瘤奠定基础。 方法 分离 BALB／c小鼠脾细胞，提取总 RNA，经 RT-PCR扩增 IL．2l基因片段，构建重组质粒 pcDNA3．1(一)．IL．21，分组免疫小鼠，检测其脾细胞膜表面 CD分子。结果 重组质粒测序结果 与GenBank中序列一致，大小为490bp。核酸疫苗免疫组小鼠脾细胞表面CD分子表达量明显高于 PBS和 pcDNA3．1(一)空质粒组。结论 成功的构建了重组质粒 pcDNA3．1(一)IL．21，该核酸 疫苗免疫小鼠后，可有效地诱导其体内T细胞的活化增殖。 【关键词】 T淋巴细胞； 白细胞介素21； 基因克隆 ActivationandproliferationofTlymphocytewithcloningofIL-21gene LiuLinlin．Departmentof PathogenyBiologyandImmunoloyg,ShandongMedicalCollege,Linyi276002,China Email126．com [Abstract] Objective Inordertoestablishthefoundationofhtetunlorhterapy,weconstructhte recombinantinterleukin21eukaryoticexpressionplasmid．M ethods TheIL一21genewasamplifiedrfom lymphocytesfrom spleensofhteBALB／cmice．After10daysrfom htemicewereimmunized，weassayed hteCD oflymphocytes．Results Th esequenceofIL-21geneamplifiedwasinaccordance、m thatni GenBankdatabase，whichwas490bp．TheCDlevelsofgroup thpcDNA3．1(一)-IL-21werehigherhtna htePBSandpcDNA3．1(一)groups．Conclusion Therecombinnatinterleukin21eukaryoticexpression plasmidwasconstructedsuccessfully．Th evaccineCna inducetheeffectiveactivationna dproliferationofT lymphocyte． [Keywords] T-lymphocytes；Interleukin21；Geneclone 白细胞介素21(Interleukin．21，IL．21)由美国 御中也发挥了重要的作用5【】。但其机制尚不完全清 Parrish等ⅡJ，J、组首次从人CD3T细胞的eDNA文 楚。本研究通过构建 BALB／c小鼠白细胞介素．21 库克隆出并命名 。该细胞 因子与 白细胞介素．4 pcDNA3．1(一)．IL．2l重组表达载体，并用其免疫 (IL_4)、白细胞介素．7 (IL．7)、 白细胞介素．9 小鼠，通过与PBS组、空质粒组、IL．21组比较， (IL一9)、白细胞介素 13(IL．13)及 白细胞介素一15 研究其对小鼠细胞免疫应答和体液免疫应答的影 (IL一15)共同属于 白细胞介素．2(IL．2)细胞因子 响，本文仅讨论其介导的T细胞活化增殖规律，为 家族的一员，与其家族成员共用一个受体亚单位 1， 进一步研究 IL．21基因在肿瘤治疗方面的应用奠定 链 。IL一2l主要来源于CD4~Th2细胞和NKT细胞 基础 。 等细胞2【】，是一种具有多种生物学功能的细胞因子， 材料与方