应用重组抗原诊断弓形虫病的研究进展.pdfVIP

2014年 5月第 2卷第 2期 ChinJDiaznosties(ElectronicEdition)．May2014．Vol_2．N0．2 · 59 · · 综 述 · 应用重组抗原诊断 弓形虫病的研究进展 王卫艳 黄炳成 随着分子生物学的发展 ，对弓形虫重组抗原的研究取得 所特异识别。到 目前为止，rSAG1检测效果已基本达到市售 了一系列的进展 ，多种弓形虫抗原基因通过基因工程手段得 抗体检测试剂检测水平 ，Selseleh等 “将 SAG1基因亚克隆 以表达并应用于弓形虫防治研究，这些抗原包括膜表面抗原 到PET一28a表达载体中，诱导表达得到rSAG1后与商品化 (surfaceantigen，SAGs)、致密颗粒蛋白(densegranuleproteins， IgM和 IgGELISA检测试剂盒 (Trinity，USA)比较，结果显示 GRAs)、棒状颗粒蛋 白(rhoptryproteins，ROPs)、微线体蛋白 敏感度分别为 87．0％和 93．0％，特异度均可达 95．0％。 (micronemeproteins，MICs)以及基质抗原等 J。重组抗原在 2．膜表面抗原2(SAG2或 P22)：SAG2是只在侵入期速 弓形虫病诊断方面的研究一直存在两个方面，一方面是针对 殖子上表达，而在子孢子期和缓殖子期不表达的表面蛋白， 每一种抗原进行单独研究以确定其免疫特性，是筛选高效诊 具有较强的免疫诱导作用 ，其重组抗原在血清检测中对急性 断抗原的主要途径，同时对于弓形虫感染机制等方面的研究 感染血清的反应强度要明显高于慢性感染血清，可应用于急 也有重要意义；另一方面是针对复合抗原的研究以期望克服 性弓形虫 的诊 断 。Huang等 利用大肠杆菌表达 单一抗原在免疫诊断中的不足 ，优化得到最佳 的抗原组合， rSAG2，通过ELISA·rSAG2可以很好地区分受感染的猫和正 达到最佳的诊断结果。当前人们对于弓形虫重组抗原的研 常猫，检测结果与乳胶凝集法(LAT)检测结果相 比较，两种 究主要集中于两个方向，一是利用抗原性进行弓形虫免疫学 方法的检测结果很相符合；Huang等 “又使用截短 的 检测，二是利用免疫原性用作疫苗进行免疫保护，本文就 弓形 rSAG2，通过免疫层析技术来检测小鼠和猫 的血清，结果证 虫重组抗原在弓形虫免疫诊断中的最新研究进展做一综述。 明是一种快速 、简便、廉价很适合于野外状况 的方法； 一 、 单一抗原在弓形虫感染诊断中的应用 Yan等 将SAG2基 因亚克隆到 pGEx_4T一1表达载体得到 (一)SAGs在弓形虫感染诊断中的应用 GST—rSAG2，并联合 GST—rROP2使用 GST—rSAG2+rROP2．LFIA SAGs是弓形虫膜表面最为丰富的蛋白质 ，依据其分子 的方法 ，在 l096份来 自不同孕妇的血清或唾液样本中，最终 量的不同依次命名为P22、P23、P30、P35和 P43，这些蛋白在 确定 Iga阳性血清20例，IgG阳性血清81例 ，IgA阳性唾液 侵入宿主细胞、免疫调节以及归转方面发挥重要作用 。 23例。 1．膜表面抗原 1(SAG1或P30)：SAG1是弓形虫速殖子 3．膜表面抗原3(SAG3或P43)：SAG3存在于整个弓形 表面的特异性蛋白 ，是诊断弓形虫急性感染最常使用 的 虫入侵过程中，是参与弓形虫入侵宿主细胞的主要分子，介 膜表面抗原。在 Handman_4和 Kasper 识别并分离后，人 导弓形虫对宿主细胞的识别和黏附 。慢性弓形虫病 们一直致力于 rSAG1(recom