烟草烟雾吸入对大鼠脑组织E-selectin和TNF-α与影响论文.pdfVIP

中文摘要 ／ 首 毫 I缺血性脑血管病是常见病、多发病，其致死率与致残率均很 高，是导致患者致残和认知功能障碍的主要原因，是威胁人们健康 和导致生活质量下降的主要疾病之一。吸烟是缺血性脑血管病的 危险因素，近年来的研究提示，粘附分子及细胞因子在缺血性脑血 管病的形成中起重要作用，吸烟可引起血管内皮损伤及动脉粥样 硬化，其病理变化与粘附分子及细胞因子有密切关系。 粘附分子是由细胞产生，能介导细胞与细胞、细胞与细胞外基 质问相互接触和结合的一类分子。其中与动脉硬化及脑血管病发 生研究较多的为细胞间粘附分子(ICAM一1)、血管细胞间粘附分 附。缺血性脑血管病的形成与白细胞、血小板及血管内皮细胞表 面的粘附分子有密切关系，即粘附分子促进白细胞、血小板聚集于 血管内皮细胞，引起血流障碍，使缺血性脑损伤加重。 在缺血催脑血管病的形成过程中，肿瘤坏死因子(TNF一仪) 是造成损伤的重要因素。TNF一仪在缺血性脑血管病中的作用日 益受到众多学者的重视，TNF—a能够刺激血管内皮细胞表达粘 附分子，介导白细胞与血管内皮细胞的粘附。厂1。 本实验通过大鼠吸烟模型，应用免疫组织化学方法研究吸烟 lec血及TNF—a在吸烟引起脑血管病方面的可能机制，为缺血性 脑血管病的预防和治疗提供理论依据。 ·1· ／ 材料和方法 ＼ ＼1．实验材料：健康wistar大鼠60只，由中国医科大学实验动 物中心提供，实验用烟为市售某牌香烟，自制80×60x58em3的烟 博士德生物工程有限公司。 2．实验方法：健康w／star大鼠60只，随机分成六组：A组：正 常对照组；B组：非吸烟对照组；C组：短期吸烟组；D组：长期小量 吸烟组；E组：长期大量吸烟组；F组：戒烟组。长期大量组、短期 吸烟组、戒烟组每次吸烟lO支，长期小量吸烟组每次吸烟4支，每 组每天吸烟两次，每次30分钟，两次间隔4小时。长期组吸烟三 个月，短期组吸烟一个月，戒烟组吸烟一个月，戒烟一个月。各组 实验动物在各时间点，经10％水合氯醛麻醉，以150毫升肝素化 生理盐水和4％多聚甲醛250ml进行灌流固定，将固定后的标本， 常规进行水洗，材料脱水、浸蜡、包埋，在石蜡切片机上切取冠状脑 TNF—d免疫组化染色。免疫组化染色采用SABC法，DAB显色， 光学显傲镜下观察各组免疫组化切片阳性反应物沉积情况，在切 片由皮质处观测5个不重复高倍视野，分别计数E—selectin各组 阳性血管内皮细胞数及TNF一仪阳性细胞数，实验数据以均数4- 标准差表示，用SPSS统计软件进行方差分析，应用q检验，做组间 两两分析比较，P0．05有统计学意义。 实验结果 要表达在血管内皮细胞。A组及B组平均每5个视野血管内皮细 胞无表达或偶有1—2个血管内皮细胞表达，A、B两组比较无差异 (P0．05)。吸烟各组表达均升高，分别与A、B组比较有明显差 ·2· 异(PO．05)，F组较C、D、E组表达减少(P0．05)。 2．-INF—d免疫组化结果：TNF—a阳性细胞呈棕色，阳性细 胞为神经元、脑胶质细胞和血管内皮细胞，A组及B组平均每5 个视野有少量阳性细胞表达。A、B两组比较无差异(P0．05)。 吸烟各组表达均升高，分别与A、B组比较有明显差异(P0．05)， F组较C、D、E组表达减少(PO．05)。 讨 论 吸烟是促进脑梗死形成的重要危险因素，吸烟引起缺血性脑 血管病的确切机制不清楚，大量研究表明粘附分子及炎性细胞因 子介导的炎性反应在脑梗死形成中起着重要作用，研究吸烟后E —seleeiin和TNF一仪的变化对探讨吸烟引起脑梗死发病机制有 重要意义。 香烟燃烧的烟雾可分为气体和微粒两部分，超过4000多种有 害物质已被证实，其中主要的有毒复合物包括一氧化碳(CO)、尼 古丁和焦油。CO进人人体后大部分与红细胞内血红蛋白结合， 形成碳氧血红蛋自(COHB)，引起缺氧和血管损伤。此外，尼古丁 和焦油等有害物质可直接损害血管肉皮细胞，导致血管内皮功能 失调。目前，普遍认为，血管内皮细胞