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药物分析杂志
巫山淫羊藿的指纹图谱及相似度计算方法的考察+
吉红梅 周颖新 孙文基
(西北大学/陕西省生物医药重点实验室西安710069)
巫山淫羊藿阻wushanense
T.S.Ying)是中国药典淫羊藿所属的一个种,主产于四川、陕西、湖北的
等地。各种淫羊藿药材叶形相似,通过形态鉴别使巫山淫羊藿得以区分,较为困难。我们初步研究了巫
山淫羊藿的指纹图谱,目的在于和其它种淫羊藿相区别。
现多用相似度对比软件来判别中药指纹图谱相似度,相似度对比软件对指纹图谱的数据处理主要有
两个关键因素,一是电信号的处理,二是采用的计算方法。计算方法有相关系数(包括中位数相关系数
法、均值相关系数法),夹角余弦法,模糊相关法等。不同的算法适用于不同的品种。
1仪器与试剂
色谱纯,其他试剂均为分析纯。水为高纯水。巫山淫羊藿、箭叶淫羊藿样品由陕西省安康地区药品检验
所中药室提供,经朱朝德主任药师分类学鉴定分别为Ewushanense Zucc.)
T.S.Ying、Esagittatum(sieb.Et
Maxim.的干燥植物体。柔藿苷和淫羊藿苷对照品均由中国医学科学院北京药物研究所贾敏鸽同志提供。
使用中南大学、西北大学相似度计算软件。
2方法
2.1液相色谱条件:流动相为乙腈.水(25:75);检测波长270nm;流速lmL·min一。
1.t m的滤
质量,于超声波清洗器间隙超声30min。加入稀乙醇补足损失的重量,摇匀,滤过,再用0.45
膜过滤,即得。
u
2.3测定方法:取各供试品溶液20L,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,即得。其中1—5峰为该图
谱的特征峰,见图1、图2。
^巫山淫羊藿
mn
40
B茬革藿
C箭叶淫革l
叫1111
图1巫山淫羊藿的指纹图谱图 图2巫山淫羊藿、淫羊藿、箭叶淫羊藿指纹图谱比对
‘中国药典2005年版科研资助项目国药典发(2003)45号
23(增刊),2003 3l
2.5对照实验:取柔藿苷、淫羊藿苷对照溶液200l/L,注入高效液相色谱仪,记录色谱图,见图3。
图3柔藿苷(A)和淫羊藿苷(B)对照品色谱图
3结果
3.1由图l,2,3可见三种指纹图谱特征性在于色谱峰相互比例差异较大。巫山淫羊藿、淫羊藿、箭叶淫
羊藿中均有淫羊藿苷(3号峰),柔藿苷(5号峰)。但后两种中淫羊藿苷含量较高;柔藿苷是巫山淫羊
藿中主要色谱峰,在淫羊藿、箭叶淫羊藿为次要峰。
3.2用相似度计算软件分析5批不同采收期的巫山淫羊藿色谱数据,不同采收期的巫山淫羊藿相似度均高于0.99。
3.3分别取四批巫山淫羊藿、淫羊藿、箭叶淫羊藿供试品按2.1.3项下操作,所得色谱数据以色谱峰原始
图4。
不同月份采集巫山淫羊藿之间的相似度较高(均大于0.99)。用夹角余弦法计算所得相似度均值巫山
羊藿。
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