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一些分子生物学实验小技术汇编 ??点击次数：284??发布日期：2008-12-10????仅供参考，谢绝转载，否则责任自负 1．保存菌种 保存菌种或长时间放置的培养板应先划板活化菌种，挑取分隔良好的单 克隆接种于2-10 ml ＬＢ中（如菌种含质粒则应加抗生素）３７摄氏度快摇 ８小时，按0.1%-0.5% 比例转种，培养基的量不应超过锥瓶的0.25容量，以 保证足够的通气。用OD.600 测菌密度时，读数值在0.1-0.5 范围内为线性相关，超过该范围的应作稀释。通常１升的过夜培养12-16h，湿重为3 g左右，密度往往是3-4 ′109 个细胞／每毫升培养物离心收菌后可在-20摄氏度冻存数周。 2．TSS 法快速转化大肠杆菌 A．过夜培养物转种后27拚２度快摇约205hrs至O.D 值为0.3 左右。 B．取１ml菌液离心收菌，加入0.1ml 冰浴的1 ′TSS 液轻轻吸打悬起细胞。（可以放-70 摄氏度冻存半年）B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 ′TSS 混匀，该方法只适于做质粒转化，如做连接产物转化请按２Ａ做。 C．加100pg-10ngDNA 混匀。冰浴10min ，室温放置10分钟再次冰浴10mins. D．加1ml LB，37摄氏度1 小时。 E．涂板。转化效率106-108 对于DH52，Ｃ600 ，等转化效率在107-108 以上