Vasa、卵泡抑素(FST)和抗缪勒氏管激素(AMH)在半滑舌鳎繁殖周期中与作用研究.pdfVIP

玩阳、卵泡抑素(殿丁)和抗缪勒氏管激素(删)在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究 场s口、箩日泡抑素(丹丁)和抗缪勒氏管激素(彳朋日)在半滑 舌鳎繁殖周期中的作用研究 摘要 半滑舌鳎(C咖枇淞sPmf肠纠括Gmntber)是我国近海的大型名贵经济鱼 类。本研究利用分子生物学和m]卧限原位杂交技术，分析了Ⅶa、卵泡抑素 (follistatin，FST)、抗缪勒氏管激素(aIlti．mull砸an honnone，AMH)在半滑舌 鳎繁殖周期中的功能，所得结果与结论如下： 1．半滑舌鳎№口基因的克隆和表达 本研究克隆了半滑舌鳎‰口基因的cDNA序列，其全长2 602bp，编码包 含722个氨基酸残基的蛋白质，有一个经选择性剪切形成的亚型。推导的氨基 RG重复。组织表达分析表明，№口基因在性腺中表达量丰富，性腺外组织仅 在心脏中有微量表达。 利用ImPCR和mRNA原位杂交技术研究了csvasa在性成熟半滑舌鳎繁殖 周期的表达模式。在卵巢中，V瓠a的表达量在初级卵黄期和囊泡期要显著高于 核周期和退化吸收期；精巢中，Ⅷa在精子细胞增殖期的表达量要明显高于精 母细胞增殖期和精子成熟期。这些结果表明，V瓠a可能在半滑舌鳎的配子发生 mI玳A 中起重要作用。初级卵黄期卵巢的ⅧamRNA原位杂交结果显示，‰a 在Ⅲ期卵母细胞的胞质中均匀分布，外周皮层信号强度较高。 2．半滑舌鳎R汀基因的克隆和表达 采用RACE技术克隆得到了半滑舌鳎FST的cDNA序列，其全长1455bp， 编码包含321个氨基酸残基的蛋白质，属于TGFB家族。组织表达分析表明， FST在半滑舌鳎13中组织中均有表达，其中在性腺中表达最高，脑和鳃中表达 量较高，证明FST具有广泛的生理作用。 利用RT-PCR技术研究了FST在性成熟半滑舌鳎繁殖周期的表达模式。在卵 巢中，FST的表达量核周期最高，初级卵黄期和囊泡期较高，推测FsT抑制FSH 肠s口、卵泡抑素(R”)和抗缪勒氏管激素(』肋曰在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究 刺激的卵母细胞发育的作用，而对LH无明显作用；精巢中，FST在各个时期 均有表达，并且精子细胞增殖期表达量较低，推测这是因为FST对芳香化酶的 调节功能所致。 3．半滑哥鳎AMH基因的克隆和表达 采用RT-PCR技术克隆得到了半滑舌鳎AMH的cDNA片段序列，长度 半滑舌鳎的性腺中表达，并且在精巢中的表达量要高于卵巢。 利用R1冲CR技术研究了AMH在性成熟半滑舌鳎繁殖周期的表达模式。 在卵巢中，AMH在初级卵黄期和囊泡期表达量较高，在退化吸收期最高，推测 鱼类的AMH与哺乳类一样具有抑制FSH的作用。研究还发现，在雌性半滑舌 鳎繁殖期中，AMH可能具有抑制LHR表达的功能。精巢中，AMH在精母细 胞增殖期表达量最高，进入繁殖期后表达量显著下降，与AMH在哺乳动物进 入青春期后被睾酮(T)抑制相一致，证明在鱼类中AⅫ同样被T抑制。此外， AMH具有组织精子发生启动的生理功能。 ■ 关键词：半滑舌鳎V瓠a卵泡抑素、抗缪勒氏管激素繁殖周期 玩跚、卵泡抑素(彤丁)和抗缪勒氏管激素(彳^甜)在半滑舌鳎繁殖周期中的作用研究 Studiesonfunction of髟弧口、加刀缸勉砌and绷厉删I抛砌以 ■ ●， ● ^D，J竹D刀Pin of semtl征evts reproductiVecycle n02lossns Giinther Abstract a iIlshore Hal