NF-κB在肾脏病中的研究与中药介入作用.pdfVIP

基础研究 UPEC生存环境的改变，进而影响Aer对铁的摄取，阻断养第15天。培养基中细胞较前生长更茂盛、密集，满布培养基 UPEc的营养来源，抑制uPEC的生长，此而起到治疗尿路感表面，部分细胞融合成片，视野内所见细胞均可见形态不规则 染的作用。 细胞核。在细胞培养第20天，培养基中细胞生长密集，满布培 8．本课题原代培养标本来源之所以取材于中国人，是因 养基表面，呈鹅卵石样；将培养基中生长成熟细胞经免疫细胞 中国人群的血型大多为P血型阳性，其尿路上皮细胞具有特 化学染色(×100倍、×枷倍)后镜下观察细胞成像：细胞均质 异P血型抗原物质。P血型抗原物质能与UPEcP菌毛特异结透亮，细胞形态呈扁平不规则多角形，细胞核位于细胞质近中 合，所获得的原代细胞将更适于uPEc的粘附特性研究。 央处，细胞核呈圆形，胞核染色呈蓝色，胞浆呈棕黄色。通过对 9．本课题尿路上皮细胞原代培养采用组织块法，培养基 培养基中细胞生长情况观察我们可得出如下结论：培养基中 体系采用添加成分(BPE，EGF)的KSFM培养基体系，之所以细胞呈正常上皮细胞形态生长，其细胞生长状态良好，于正常 采用上述方法，是因为：首先导致肾盂上皮细胞原代培养难度 细胞生长周期内长成正常形态上皮细胞，这说明本课题所采 的原因有多个，其一：肾盂上皮细胞对其成长的环境要求极其 用的尿路上皮细胞原代培养方法是可行的，这为尿路上皮细 苛刻；其二，肾盂上皮细胞的体外繁殖能力明显低于其他细 胞原代培养提供了一种新的方法，有利于对进行UPEc的粘 胞；其三，表皮角质形成细胞的培养方法是目前国外对UEC 附特性的深入研究。 的原代培养比较通用的技术，此项技术培养基为含胎牛血清 四、结论 的培养基，以小鼠3，I3细胞作为uEc的滋养层，但是滋养层 细胞制备复杂，应用条件严格难以推广。其次为寻求最佳方 力基因的研究所得到的技术指标，可用来建立高灵敏度抗 法，我们曾在预实验中尝试了各种培养方法，并对各种培养方 UPEc药物筛选模型，为今后的抗UPEC中药筛选产业化研 法的优缺点进行综合分析评估，最后我们还是认为组织块法 究提供关键参数。 更适于肾盂移行上皮细胞的原代培养，因此本课题尿路上皮 2．本研究对尿路上皮细胞原代培养法进行了改良，应用 细胞原代培养采用组织块法，培养基体系采用添加成分 组织块法，采用添加成分(BPE，EGF)的l(SFM培养基体系， (BPE，EGF)的KsFM培养基体系。 成功培养出正常尿路上皮原代细胞，这说明本课题所应用的 观察按照改良后的尿路上皮细胞原代培养方法培养细 原代细胞培养方法是可行。 胞生长情况：在细胞培养第5天，培养基中组织小块的周围可 3．按照温阳通淋原则提取的中药水溶性小分子物质可降 见有形态呈岛状细胞生长，细胞散布培养基表面；在细胞培养 低uPEC体外尿路上皮细胞的粘附作用，是其治疗尿路感染 第10天，培养基中细胞继续生长，培养基表面细胞增多，细胞 的作用机制之一。 形态仍呈岛状，少数细胞内可见形态不规则细胞核；在细胞培 参考文献：略 N F—KB在肾脏病中的研究及中药介入作用 杨珍 孔薇 南京中医药大学三附医院，南京市中医院 源区RHD(relhomo鹳nous 核因子一KappaB(NF—KB)是一个重要的转录因子，可被 诱导，调控着众多基因的表达。最初是从B细胞的核抽提物 d峭a1)嘲。他们通常是以同源或异源二聚体的形式存在于细 中发现的一种能与免疫球蛋白K链基因的增强子KB序列 胞内，并能对靶基因转录产生积极或消极的影响。在静息状态 ofNF— (GGGAcTlTIcc)特异性结合的核蛋白因子【l】。其作用广泛，除下，NF—KB二聚体与抑制性蛋白质IKB(IIlllibitor 在免疫系统的发育和功能中发挥突