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细菌耐药与治疗 浙江大学医学院附属第一医院 俞云松 病原微生物检测的要求 各级医院应重视病原微生物检测工作,切实提高病原学诊断水平,逐步建立正确的病原微生物培养、分离、鉴定技术和规范的细菌药物敏感试验条件与方法,并及时报告细菌药敏试验结果,作为临床医师正确选用抗菌药物的依据。 病原微生物检测的要求 三级医院必须建立符合标准的临床微生物实验室,配备相应设备及专业技术人员,开展病原微生物培养、分离、鉴定及细菌药敏试验工作;并建立室内质量控制标准,接受室间质量评价检查。 病原微生物检测的要求 二级医院应创造和逐步完善条件,在具备相应的专业技术人员及设备后,也应建立临床微生物实验室,正确开展病原微生物的培养、分离、鉴定和规范的细菌药物敏感试验。目前不具备条件的,可成立地区微生物中心实验室或依托邻近医院的微生物实验室开展临床病原检测工作。 细菌初步分类 G+coccus G+ G+bacillus G G-coccus G- G-bacillus 前11位分离菌 G+ 球菌感染呈上升趋势 过去20年间,在严重感染的抗 生素治疗中出现了两个问题: 革兰阳性菌感染逐渐增多 革兰阳性菌对抗生素的耐药日趋严重 金黄色葡萄球菌感染致病因子 荚膜:多糖荚膜、聚-N-琥珀酰β-1-6葡糖胺(PNSG) 黏附因子:纤维蛋白原结合蛋白、纤维蛋白凝结素结 合蛋白、胶原结合分子、弹性蛋白黏附素等。 毒力因子:酶:凝固酶、脂酶、蛋白酶、热稳定核酸酶等;毒素:肠毒素、溶血素、TSST、杀白细胞素等 黏附因子及毒力因子表达的调控蛋白 耐甲氧西林葡萄球菌定义 即对耐酶青霉素(甲氧西林)耐药的葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus, MRS) 耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus,MRSA)最早发现,流行很广 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin-Resistant Coagulase Negative Staphylococcus,MRCNS),其中最主要的是MRSE。 院内MRSA感染已成为严重的问题 我院2002年革兰阳性菌分离情况 G+菌692株,占总数的23.1%; 肠球菌145株,占阳性菌的25.2%; 葡萄球菌415株,占阳性菌的72.0%; 链球菌87株,占阳性菌的0.8%; 葡萄球菌,苯唑耐药77.8%; 肠球菌,庆大高耐63.1%; 血培养阳性168株 凝固酶阴性葡萄球菌 55株; 肺克18株; 大肠13株。 PBP2a的作用 PBP2a与β-内酰胺抗生素亲和力低,替代正常PBP功能 87Kda——PBP1—— 80 ——PBP2—— 78 ——PBP2a 75 ——PBP3’—— 70 ——PBP3—— 41 ——PBP4—— MRSA检测 药敏检测法(表型检测法) (以苯唑西林替代甲氧西林) 基因诊断法(mecA基因检测) 葡萄球菌-头孢西丁 “用30ug纸片的头孢西丁的药敏结果及新的折点能预测mecA介导的耐药” 纸片扩散法筛选葡萄球菌中mecA 头孢西丁(30 ?g) 纸片,常规操作 培养 24 h; (若耐药,18h也可出结果) 结果要报 OXACILLIN 耐药,而不是 头孢西丁 纸片扩散法筛选葡萄球菌中mecA(续) 头孢西丁 抑菌圈 (mm) S. aureus ? 19* ? 20** CoNS ? 24* ? 25** * 报告 oxacillin R ** 报告 oxacillin S CoNS, coagulase-negative staphy
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