基于SRAP标记的莲种质资源遗传多样性分析.pdfVIP

长弘互暮(学术版) 一35一 JOURNALOF VEGETABLES CHANGJIANG DOI：IO．3865／j．issn．1001-3547．2012．16．010 基于SRAP标记的莲种质资源遗传多样性分析 欧阳冬梅‘，刘凰1，徐金星2，刘春华2，邹东旺1，杨良波2，唐记平1，谢克强1 (1．江西广昌县白莲产业发展局，344900；2．广昌县白莲科学研究所) 摘 要：利用SRAP标记对来自国内外莲主要产区在20世纪初期育出、并在莲育种中具有重要利用价值的40份莲 属材料进行了分析。1l对引物在40份材料中共扩增了184条条带，多态性条带127条，多态性频率为69．0％，表明 莲属具有丰富的遗传多样性。聚类分析结果表明，莲属种质资源可分为3大类群，这与传统意义上的形态学分类相 一致：且40份莲品种(材料)表现出很强的地域相似性，这说明来自同一个地域内的品种(材料)分化程度低，遗传多 样性不丰富．极易造成品种单一化。 关键词：莲：SRAP：遗传多样性分析 我国是莲的原产地之一，莲在我国不仅栽培历 1．2样品制备 史悠久，而且分布广泛，且是最具特色、栽培面积最 采集莲幼嫩叶片置于塑料袋中(自封袋)，再加 大、品种资源最丰富的水生经济作物I”。迄今为止． 入变色硅胶，摇动使叶片与硅胶充分均匀接触。一 中国拥有花莲品种资源800多个【2]，藕莲品种和子般来说．硅胶与叶片质量比应为10：1．以保证叶片 莲品种资源分别数十个。莲是常异花授粉植物，不 在12h内干燥，一旦发现硅胶从深蓝变为粉红，及 同品种间的基因交流很容易通过昆虫的授粉来完 时更换硅胶，干燥的叶片材料在室温下保存即可。 成。导致品种间遗传资源的混合和品种内的遗传差 1．3 DNA的提取 异较大㈣。目前，我国莲同种异名现象时有发生．同 选取上述硅胶干燥的叶片30mg，用液氮磨成 一地区品种单一化现象严重，大大增加了莲栽培的 粉状，再用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA。 风险性。为了避免这一现象，选取了40份代表性品 DNA质量检测用l％的琼脂糖凝胶进行，电泳缓冲 种(材料)进行SRAP遗传多样性分析，以期明确它液为0．5xTBE，电压100V，电泳30min。 们的遗传背景，探讨全国各地主要传统型品种与广 1．4 SRAP分析 昌县现有栽培品种的关系，从而为莲品种选育提供 PCR扩增反应总体积为15¨L，反应混合液中 buffer15 理论依据。 包括：50 DNA模板1“L，10xPCR ng／p。L IxL， 10mmol／LdNTPs0．6 mmol／L上下游引物各 1材料与方法 IxL．10 0．5斗L，2U／IxLTaqDNA聚合酶0．5斗L，不足部分 1．1 试验材料 用无菌水补充。 试验所用40份莲品种(材料)为国内外莲主要 PCR扩增反应程序为95℃5rain；95℃1rain． 产区在20世纪初期广泛应用于生产的优异材料。 35℃1 1 1 min，720