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美容胜肽的定性定量分析 silat 广 州 欣 浪 生 化 技 术 开 发 部 2013-9-28 广州市白云区太和北太路民营科技园联炬大厦 1411 摘要： C-18 反相液相色谱研究几种化妆品界常用的肽的分析条件，并找出定性和定量的方法。美 容功能肽，根据其修饰方式不同导致的溶解性差异分为水溶肽（如：乙酰六肽-3、乙酰四 肽-5 等多种）和脂溶肽（棕榈酰五肽-3、肉豆蔻酰五肽-17 等）两大类来定性和定量分析。 定性分析使用质谱（MS）更加精确。 关键词：美容胜肽，液相色谱，乙酰四肽-5，乙酰六肽-8，棕榈酰五肽-3，质谱 前言 目前美容胜肽已成为化妆品主流添加剂，在国外品牌应用越来越广泛，有近 50 款 应 用 于 各 品 牌 化 妆 品 中 。 因 为 胜 肽 类 原 料 含 量 一 般 为 含 量 低 的 溶 液 （100-2000ppm），外观无多少差别，常规检测方法基本束手无策。目前还没有完 整的国家标准和行业标准，本公司根据多年的在美容胜肽方面的生产经验和国外文 献对常见的美容胜肽的分析方法和条件进行了长时间摸索对比。 目前美容胜肽的分析最常规的分析方法有：高压液相色谱（HPLC）、质谱分析、 肽序分析、氨基酸分析等，最必须和最常规的分析手段是高压液相色谱。 1 高压液相色谱（HPLC） 高压液相色谱（HPLC）是美容胜肽分析最常用、最关键的分析手段，出峰时 间有胜肽的极性决定，同一胜肽的峰面积和含量成正比。美容胜肽根据溶解性可分 为两类：水溶性胜肽和脂溶性胜肽。水溶性胜肽分为非修饰肽（如：五肽-3 等）和 乙酰修饰肽（如：乙酰六肽-3、乙酰四肽-5 等多种）；脂溶性胜肽因为常以棕榈酰 或肉豆蔻酰修饰（棕榈酰五肽-3、肉豆蔻酰五肽-17 等）。 这两类肽的极性差别大，液相分析都采用梯度分析，所以条件也不同。 本综述和实验结果由 欣浪生化技术开发部 提供 1.1 液相色谱定性分析水溶胜肽 水溶性胜肽由于极性相近可采用以下同一条件： Solvent A : 0.1%Trifluoroacetic in 100% Acetonitrile Solvent B : 0.1%Trifluoroacetic in 100% Water Wavelength : 220nm 总流速 ：1.000mL/min LC 时间程序 时间 单位 命令 值 注释 0.00 Controller Start 进样分析开始 0.00 Pumps B.Conc 98 25.00 Pumps B.Conc 73 25.01 Pumps B.Conc 0 清洗起始 30.00 Pumps B.Conc 0 清洗结束 35.00 Pumps B.Conc 98 恢复到起始状态 35.00 Controller Stop 结束 图 1.1 ：几款常见水溶胜肽的液相图谱： 从图中可以看出每一种肽的出峰时间是不一样的，而且完全分离开，并没有 重叠，因此可以通过保留时间进行定性分析，具体见