果蝇中miR274与其可能的靶基因Derailed+2(Drl2)相互作用的研究.pdfVIP

路刺激其异常增殖，从而引发动脉粥样硬化．在前期实验中发现高糖可以引起[C矿]的升高和丝裂原活化蛋白檄酶活 性的增强从而诱导血管平滑肌细胞的增殖和DNA合成。为此，筛选在临床上对心血管疾病有明显疗效的丹参酮Ⅱ研 究其对高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用，及与丝裂原活化蛋白檄酶信号传导通路的可能作用点。为进一 步深入研究萁药用价值探讨2型糖尿病血管并发症的发病机制与防治方法． 丹参酮IIA是丹参的脂溶性有效单体，临床上主要用于心绞痛的治疗．在以往的研究中发现其许多药理作用． 如天然的抗氧化作用、抗肿瘤作用等。近来研究表明该药对多种人和动物肿瘤细胞株具有细胞毒杀伤作用．对体内 外肿瘤细胞的DHA合成有明显抑制作用“I．有研究表明丹参酮ⅡA通过阻止巨噬细胞源性生长因子促进的myc高表达， 从而抑制血管平滑肌细胞的增殖“1，以及诱导肿瘤细胞的分化成熟，并使其最终凋亡阍．但丹参酮HA是否抑制高糖诱 导的血管平滑肌细胞的增殖，尚未见报道． 为此．实验用四甲基噻唑蓝比色法测定细胞内线粒体脱氢酶的活性，评价丹参酮HA对血管平滑肌细胞的毒性Ⅲ． 实验结果表明，当丹参酮lIA剂量大于1．0mg／L时，可造成细胞功能障碍，有一定的细胞毒性．因此在评价丹参酮 Ⅱ^对细胞增殖的影响时，应严格区分药物的细胞毒性与抗细胞增殖作用。当使用O．5mg／L丹参酮IIA与正常大鼠 血管平滑肌细胞连续孵育6d。细胞未出现悬浮死亡亦无丝裂原活化蛋白激酶活性改变．但其细胞数量明显下降，表 明该剂量丹参酮ⅡA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用是由于对细胞增殖的抑制而并非由细胞毒性所致。 本实验中发现．高糖可诱导大鼠血管平滑肌细胞的增殖和DNA合成，且呈剂量和时间依赖性，同时可刺激平滑 肌细胞内游离钙离子浓度升高及丝裂原活化蛋白激酶活性增强；但当使用了丹参酮HA亦或U0126后，对高塘诱导的 细胞的增殖和DNA台成呈现显著的抑制作用，而且降低了细胞内钙离子的浓度和丝裂原活化蛋白激酶水平；高糖条 件下，向大鼠血管平滑肌细胞中加入丹参酮IIA后，其细胞的DNA合成被明显抑制．并星现一定的浓度效应，细胞内 丝裂原活化蛋白激酶的活性水平也明显下降．同样，使用了丝裂原活化蛋自傲酶的特异性抑制剂—u0126做平行对 照实验，也得到了同样的结果．故推测丹参酮IIA可能是通过部分阻断了丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路从而抑制 了高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞的快速增殖，而此作用也有待于在动物实验中继续研究与证实．实验结果发现． 在一定浓度范围内，丹参酮IIA可抑制高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖并呈剂量和时间依赖性．高糖条件下，加入不 mglL)对 同浓度的丹参酮IIA后，测定血管平滑肌细胞中BrdU掺入DNA的量发现，丹参酮IIA在较低浓度(0．0625 DNA的合成即呈现抑制作用，而且，丹参酮HA还可抑制高糖诱导的丝裂原活化蛋白激酶活性的增强。因此丹参酮U A通过抑制高血糖导致的异常细胞增殖对糖屎病血管并发症具有一定的防治作用。 参考文献 【l】孝田昌，庞永正，苏静怕，等丝裂原话化蛋白辙酶活性测定[J】．基础医学与临床．1995．15(2)：158-60 II l Raf—I a kinase [2】 AraiH，5scobedeJA．Aagiotensintypereceptorsienalsthroughby protein mechanisL胁，Pha．r=acoI 1996；鼬(3)：522-8 anticanceroftanshinone 【3】 -蚰g焉|elLYw％et^1．Potentialactivity IIAagainsthumanbreastcm,lcer．知t_，锄ceY, 2005 Sep20；i16(5)：799-807． [4】张文军，包骁峰J王秀风．等．丹参酮ⅡA硫酸钠抑制巨噬细胞源生长因子刺激平滑肌细胞Cllyc表选[J]．中国动脉硬化杂 志．199电4(1)：49-7 。 [5】粱勇．羊裔明．裒淑兰．丹参酮药理作用及临床运用研究进展【J】．中草药，2000，31(