尼古丁对肺腺癌细胞生长及化疗敏感性的影响.pdfVIP

HElLONGJIANGMEDICINEANDPHARMACYFeb．201 No．1 ·9· 3。V01．36 尼古丁对肺腺癌细胞生长及化疗敏感性的影响 袁丁，陈小明，谢佐福 (福建中医药大学生理教研室，福建福州350108) 摘要：目的：研究尼古丁体外对肺腺癌细胞生长及化疗敏感性的影响。方法：应用MTT探讨尼古丁对肺廉癌细胞SPC— ng ·mLl)、DDP(50～50000 细胞生长，且能明显降低谊细胞对Ing·mLl5一FU的化疗敏感性，但并不减低对DDP争ADM的化疗敏感性。尼古丁也不 能显著诱导对SPC—A～1细胞的MDRl基因表达。 关键词：尼古丁；肺癌；化疗敏感性；体外实验；多药耐药基因 中图分类号：R734．2；Q786文献标识码：A文章编号：1008—0104(2013)01--0009—02 近几十年来．我国肺癌发病率和死亡率都呈显著上升。 在有的城市，如北京．男性肺癌死亡率为恶性肿瘤之首。吸 仿，混均后低温离心，取上层水相，加异丙醇，离心沉淀 烟是肺癌发生的重要原因，大约有3／4的肺癌是由吸烟引起 RNA，弃上清后用75％酒精漂洗，气干后加无菌DEPC水溶 的，而尼古丁是香烟中的重要成分，是引起吸烟者成瘾的罪 解RNA。 AGT 魁祸首，在烟民的血液中含羞高达90～1000nM。尼古丁不仅1．4．2引物和探针：引物：MDRl上游引物：5’一CTC AGCCTGATGGTTrrTCTT 能收缩血管，升高血压，提高心率，损伤血管内皮细胞，而且 C一3’；MDRl下游引物：5’ --GGAGATGCCTGTCCAACACTA 近年来研究还表明，尼古丁可抑制肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤 AA一3’．TaqMan TCT CTCAGGTAT rnCTGTAT 细胞生长，降低肿瘤对化疗的敏感性[1“]。本研究探讨了尼 探针：6FAM一”c 古丁体外对人肺腺癌细胞SPC—A一1化疗敏感性及其多药TAMRA． 耐为基周MDR】交达．的影响． 1．4．3逆转录反应：标本处理后的RNA70变性Stain。按每 l 材料与方法 1．1试剂、药物及细胞培养 I#L计算加入反应管，再加预变性的RNA5pL，37℃反应 3min。 阿霉紊(ADM)(浙江海正药业股份有限公司生产)，顺 1．4．4PCR扩增：每个反应管中加入22pL反应液(PCR反 铂(DDP)(昆明三戌贵金属药业有限公司生产)，5～氟尿嘧 啶(5一FU)(上海旭东海普药业有限公司生产)，尼古丁 (SIGMA)。上述药品和试剂用新配翩的培养液进行系列稀 10rain。 72℃30s，共3s个循环；延伸72C 释。实时荧光定量RT--PCR试剂盒由上海久盛医疗用品有