药代动力学参数的测定----药物血浆半衰期、表观分布容积和清.pptVIP

药代动力学参数的测定 ----药物血浆半衰期、 表观分布容积和清除率的测定 Calculation of the Phrmacokinetic Parameters:Elimination Half- Life(T1/2), Apprent Volume of Distribution (Vd) and Plasma Clearance (CL) 南方医科大学 医学基础实验教学中心 2012年 目的(purpose)： 1.以酚红(酚磺酞，Phenol red)为例，学习测定药物血浆浓度半衰期(T1/2)、表观分布容积(Vd)、清除率(CL)的基本方法 2.计算Vd、CL、T1/2及了解三者之间的关系 原理(principle)： 酚红为酸碱指示剂，酸性条件下黄色，碱性条件下紫色 酚红在体内属一级动力学消除，根据血浆浓度与时间关系，可求出T1/2、Vd、CL 实验材料(material)： 分光光度计，高速离心机，婴儿秤 棉绳1套，家兔动脉插管手术器械1套，动脉插管并三通管1个，玻璃试管7支，EP管6支，试管架，移液枪（200ul，1ml各1支），1ml、5ml注射器各1支 注射液：0.6％苯酚红 标准液：0.006％苯酚红 稀释液：9mg/mlNaCl 29ml+1mol/L NaOH 1ml 0.2％肝素溶液 方法与步骤 (methods and procedure) 1.取家兔1只，称重，20%乌拉坦5ml/kg体重麻醉，固定，左颈A插管。 2.用5ml注射器抽取A血1.5ml，打入EP管①中（提前用1ml注射器加入1滴 0.2％肝素抗凝剂，不要摇晃）。 2.由耳缘静脉缓慢注射0.6%苯酚红,1.5ml/kg(即9mg/kg），记录给药时间，于给药后1、5、10、20和30分钟分别取A血1.5ml，分别置于肝素EP管②-⑥中。 3.将以上6个EP管离心10分钟（转速3000转/分）。 4.分别从每EP管中吸出血浆（即上清）200ul转移至另外6支试管（事先用1ml移液枪分别加入稀释液3ml/管）中，摇匀。标准液试管：200ul标准液+稀释液3ml 5.用给药前试管做对照调零，于560nm处用分光光度计测每管的光密度（OD），重复测3次。 6.计算出C1、C2，再根据公式计算出各参数值。 公式1-半衰期（T1/2） 公式2-表观分布容积(Vd) 公式3-清除率 注意事项(notes): 避免溶血：注射器要干燥；试管、EP管提前用抗凝剂湿润；离心不要太高速、太长时间 提前做好取血准备，注射器要洗净，采血时间尽可能准确，采血过程要快 每次取血后用注射器往三通管推入1ml生理盐水，防止管道堵塞 所加血样及试剂必须准确 样品离心必须平衡 分光光度计提前打开，预热，调零 注意事项2-家兔捉拿 思考题(questions): 怎样判断注射器已扎进耳缘静脉?耳缘静脉注射应注意哪些问题? T1/2、Vd、CL有何意义？ 动脉插管取血应注意哪些问题？ * * 何为T1/2、Vd、CL？ C 标准液 = OD C t t OD 标准液 C 标准液 = 0.006％ 1. 计算出各时间点（t）的血药浓度C 2. 以lgC对时间（t）用excell作直线回归，得出回归方程y=a+bt，相关系数r 3. （ K：消除速率常数， K=-2.303b） T1/2= 0.693 / K D 0 = 9mg/kg×体重 （即静脉注射进入体内的药量，mg） T = 1（第一次取血的时间） 1 K（消除速率常数）= - 2.303b CL = Vd × K（L/min） × × × 伤两肾 皮下出血 伤两耳 穿刺前将注射器内空气排空，以免形成气栓 从耳缘静脉远端开始选择穿刺点 如果注射阻力较大或局部出现肿胀，应立即拔出针头，在原注射点的近心段重新穿刺 给药尽量缓慢、均匀 注意事项3-家兔耳缘静脉注射 * * *