肝肠钙粘连蛋白与肝细胞癌的关系及对粘附和侵袭作用的初步的研究.pdfVIP

中文摘要 肝肠钙粘连蛋白与肝细胞癌的关系及对粘附 和侵袭作用的初步研究 研究生： 范正军 导师：王家祥 郑州大学第一附属医院普通外科 河南郑州450052 中文摘要 carcinoma，HCC)足最常见的恶性肿瘤之一，其恶性 肝细胞癌(hepatocellular 程度高、发展迅速、转移早、浸涧性生长、预后不佳。目自仃其治疗手段主要以 手术切除为主，但其恶性程度高且极易转移和复发，所以手术根治性切除治疗 的疗效有限。肿瘤细胞粘附性的异常是肿瘤侵袭转移和复发的重要因素。对粘 附分子的研究已经成为了解肝细胞癌侵袭与转移机制的可靠途径。 钙粘连蛋白是一种Ca2+依赖的介导同源细胞与细胞间相互粘附的粘连糖蛋 白家族。研究表明，钙粘连蛋白在细胞的伸展和移动，细胞的信号转导与活化， 细胞的生长及分化，细胞粘附，细胞识别以及肿瘤转移等病理生理活动中起到 重要的作用。因此钙粘连蛋白的表达异常就会导致细胞的粘附功能出现紊乱， intestinecadherin， 从而发生细胞结构改变和功能异常。肝肠钙粘连蛋I刍(Live LI．cadherin)是近年来发现的一类新型的钙粘连蛋白。国内外已有研究表明， LI．cadherin在胃癌、直肠癌等多种上皮来源肿瘤组织及癌组织周围有表达，并发 关系研究较少。本实验通过研究LI．cadherin在肝细胞癌组织和患者外周血清中 中的表达，并分析LI．cadherin对人肝细胞癌的作用，并在此基础上通过转染 响。为了解LI．cadherin在肝细胞癌的侵袭转移的作用和肝细胞癌的治疗提供思 中文摘要 路和理论依据。 第一部分肝肠钙粘连蛋白在肝细胞癌中的表达及意义 与肝癌临床病理特征的关系并探讨其临床意义。方法：采用免疫组织化学法检 在肝细胞癌组织和癌旁组织中有不同程度表达，肝细胞癌组织中阳性率64．3％ 乙肝表面抗原是否阳性、肿瘤的病理学分级和包膜是否完整无相关性(P0．05)； 癌的直径、是否有门静脉癌栓、肿瘤是否多发呈负相关(P0．05)。结论： 肝细胞癌生长的作用，并可能与肝细胞癌的侵袭转移能力有关。 第二部分肝细胞癌患者外周血清中肝肠钙粘连蛋白的检测及其意 义 在诊断和筛查肝细胞癌的意义。方法：采用ELISA法检测30例肝细胞癌患者术 前的空腹血清标本和20例乙肝肝硬化排除肝癌的住院患者，20例健康志愿者的 血清中LI．cadherin的含量，并分析其与临床病理特征的关系，联合检测 LI．cadherin和AFP对肝细胞癌诊断的作用。结果：1、肝细胞癌患者外周血清中 度与患者的年龄、性别、甲胎球蛋白是否阳性、乙肝表面抗原、肝癌组织是否 有包膜、是否形成癌栓、是否为多发的病理特征无相关性(P0．05)。而是与肿瘤 的直径和肿瘤分期有关(P0．05)。3、以LI．cadherin 0．900ng／ml为诊断阈值时， 对肝癌的诊断价值灵敏度为：80％，特异性为75％。4、本组实验中AFP和 II 中文摘要 结论：检测肝细胞癌患者外周血清中的LI．cadherin对诊断肝细胞癌有一定的价 值。联合检测LI．cadherin和AFP对提高肝细胞癌的诊断可能有所帮助。 第三部分肝肠钙粘连蛋白siRNA对肝癌细胞株Hep3B生长、粘附和侵袭 力的作用 效率；利用RT-PCR和Western 小室侵袭实验检测肝肠钙粘连蛋白对肝痛细胞迁移的作用。结果：1、转染 于空白对照组和空质粒转染组。3、SiRNA转染组在12h、24h与空白对照组和 空质粒转染组比较无差异(P0．05)，在36h转染组生长高于空白对照组和空质 粒转染组，但是在统计学上无显著性差异(P0．05)，48h和72h肝肠钙粘连蛋 白SiRNA转染组细胞株生长明显高于空质粒转染组和空白对照