肝型脂肪酸结合蛋白对小鼠IgA肾病中肾小球损伤的保护作用及其机制的探讨.pdf

讨论………··…………………………………·………………………………24 结论……·………”…··………………………………………………………·25 论文二 刖舌………………“…………………………………………………………。Z6前言……………………………………………………………………………26 实验材料与方法………………………………………………………………26 结果…………··………………………………………………………………·29 讨论……………·…··…………………………··…·………………·……··…33 结论…·……·……………………··?………………………………··………··35 论文三 前言……………………………………………………………………………36刖吾…““…”……………………………………””………………”““””‘36 实验材料与方法………………………………………………………………36 结果……………………………………………………………………………39 讨论…·一”······………·……………····…·…··…·····……·……····……····43 结论·……………···…·····………………··…··…··…··…………………·…45 四、本研究创新性的自我评价……………………………………………………46 五、参考文献………………………………………………………………………47 六、附录 综j苤………………·……………”……………………………………………51 在学期间科研成绩……………………………………………………………60 致谢…·……………………………“··……·………………”………………·61 个人简历………………………………………………………………………62 ·中文论著摘要· 肝型脂肪酸结合蛋白对小鼠IgA肾病中肾小球损伤的 保护作用及其机制的探讨 目 的 IgA肾病是亚太地区最常见的原发性肾小球疾病，是终末期肾衰竭的主要原 因。约40％IgA肾病患者在确诊后20年内进入肾功能不全，长期预后差。目前IgA 肾病的发病机制尚未十分清楚，缺乏特异性的治疗方法。肾内氧化应激在IgA肾 病的进展过程中发挥着重要作用，多个研究证实抗氧化剂治疗对IgA肾病有效。 肝型脂肪酸结合蛋白(L．FABP)是一种在人类近曲小管上皮细胞表达的蛋白 kD)，可以调节细胞对脂肪酸的摄取、转运和代谢，并可调控 质(分子量为14．4 脂质代谢相关基因的表达；它对长链脂肪酸的氧化产物具有高度的亲和性，是一 种重要的细胞抗氧化因子。近期的研究表明肾小管高表达的L．FABP抑制了肾小 管间质的氧化应激，发挥了肾脏保护作用，但L-FABP在肾小球疾病中的病理生 理作用尚未见研究报道。本研究旨在探讨肾小管L．FABP在IgA肾病的发病过程 中所发挥的病理生理作用及其作用机制。 本试验从以下三个方面进行了研究：1．肾小管L-FABP在小鼠IgA肾病中的表 达变化；2．L．FABP对小鼠IgA肾病中肾小球损伤的保护作用；3．系膜细胞源性 n旺吨上调IgA肾病肾小管L．FABP的表达及其保护作用。 材料与方法 第一部分：leA肾病发病ddY鼠作为供体(由日本顺天堂大学医学部实验动 线照射后，经尾静脉注射途径移植骨髓干细胞。WT受体鼠(WT／ddY组)和Tg l 定均采用ELISA法。经代谢笼收集24 ／尿肌酐(mg)的比值表示。本部分主要用免疫荧光(IF)染色的方法观察肾小 球系膜区IgA的沉积，免疫组化，Western印迹和实时荧光定量PCR法观察骨髓 移植对hL．F：ABP肾脏表达的影响。 第二部分：IgA肾病发病ddY鼠作为供体(由日本顺天堂大学医学部实验动 行骨髓移植。受体鼠暴露到身体X线照射后，经尾静脉注射途径移植骨髓干细胞。 留取血尿标本后分批处死。正常Tg(n予3)和WT(n-3)鼠作为对照组。小鼠在 处死前留尿测24h尿蛋白定量，处死时留取血和肾组织标本。肾组织切片做PAS 染色进行肾脏病理组织改变的评分，ELISA法测尿蛋白定量，并用Western印迹 法检测肾小球蛋白Ⅳ型胶原蛋白(C