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n鼠肝癌淋巴道转移细胞模型的蛋白质组学研究.pdf

Vo l. 30 高 等 学 校 化 学 学 报 No. 3 2009 年 3 月      CHEM ICAL JOURNAL OF CH IN ESE UN IV ER SITIES        517 ~524   鼠肝癌淋巴道转移细胞模型的蛋白质组学研究 1 2 3 孙明忠 , 刘淑清 , 唐建武 ( 1大连医科大学基础医学院 , 2. 生物化学与分子生物学教研室 , 3. 病理学教研室 , 大连 116044) ( 摘要  对 2株来源于同一亲本细胞但淋巴道转移力显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株 H caF 淋巴结转移率 ) ( ) ( ) 75% 和 H caP 淋巴结转移率 25% , 采用荧光差异双向凝胶电泳 2D D IGE 和 D eCyder定量分析软件及 HPLCnESIM S/M S技术 , 定量分析和鉴定了小鼠肝癌细胞 H caF 和 H caP 的差异表达蛋白. 结果显示 , 有 ( ) 116个蛋 白质点表达水平存在明显差异 p 005 , 在 H caF 中表达上调蛋 白质点 62 个 , 下调蛋 白质点 ( ) 54个. 对所有 116个蛋白质点进行了电喷雾串联质谱鉴定 , 共鉴定出 109种单一 U n ique 蛋白. 其中部分蛋 白已被报道与不同类型肿瘤的发生 、浸润和转移相关 , 多数蛋白质被首次报道与肝癌的淋巴道转移过程直 接相关. 关键词  荧光差异双向凝胶电泳 ; 高压液相色谱 电喷雾质谱联用 ; 肝癌 ; 淋巴结转移 中图分类号  O6297     文献标识码  A     文章编号 (2009) 肝癌高复发转移率已成为制约其提高预后的瓶颈 , 因此研究肝癌转移机制具有重要意义 [ 1~3 ] . 鉴 别肿瘤细胞不同转移能力的特征 , 是肿瘤诊断、治疗和预后判定的首要问题. 淋巴道转移是上皮来源 的恶性肿瘤的主要转移途径 , 临床上已将区域性淋巴结转移视为影响恶性肿瘤患者预后的最重要因 素 [ 4 ] . 通过研究遗传背景相同或相似 , 但肿瘤淋巴道高 /低转移能力不同的肝癌细胞株 , 可获得肝癌细 胞转移过程中直接影响其转移能力的关键因素 , 对深入研究肝癌转移和复发机制 , 寻求有效的抗转移 和复发的治疗措施具有重要现实意义. H caF和 H caP是一对来源于同一小鼠肝癌细胞克隆、淋巴道转移潜能显著不同、能够稳定传代 的亚克隆细胞系 , 在 6 15小鼠内淋巴结转移率分别大于 70%和小于 30% , 是研究癌症淋巴道转移机制 难得的细胞株模型 [ 5, 6 ] . 本研究应用荧光差异双向凝胶电泳对 H caF 和 H caP 细胞株的总蛋白进行了 分离 , 用 D eCyder软件 D IA 和 BVA 模块对两细胞株差异表达蛋白进行了定量分析 , 采用 HPLCnESI M S/M S方法对所有差异表达蛋白进行了鉴定 , 筛选出与肝癌淋巴道转移直接相关蛋白, 为深入探究肿 瘤转移机制 、肿瘤早期诊断和治疗提供了重要实验基础. 1 实验部分 1. 1 

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