表皮生长因子受体基因突变与肺癌病理类型的关系.pdfVIP

临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2015Feb；31(2) ·197 · 网络 出版 时间：2015—2—509：51 网络 出版地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1073．R0951．022．html 表皮生长因子受体基因突变与肺癌病理类型的关系 申龙树，朱长乐，谢 玲，孙 怡，郑燕影，陈 劫，赖仁胜 摘要：目的 探讨肺癌病理类型与表皮生长因子受体 (epi— 1 材料与方法 dermalgrowthfactorreceptor，EGFR)基因第 18、l9、21外显子 突变的关系。方法 收集 192例肺癌石蜡标本，按 WHO 1．1 材料 收集江苏省中医院2005年 1月～2013年 12月 (2004)肺、胸膜肿瘤组织学标准进行病理分类 ，提取肿瘤组 检测的 192例肺癌标本。病理类型按照WHO(2004)肺、胸 织DNA，PCR扩增 EGFR外显子 18、19、21序列，分析肿瘤病 膜肿瘤组织学 标准 ：腺癌90例，鳞状细胞癌53例，腺鳞癌 理类型与EGFR基因各外显子突变类型和频率关系。结果 32例，小细胞癌 17例；男性 121例 ，女性71例 ；年龄 36—85 192例肺癌中腺癌 90例，突变率为 32．2％(29／90)；鳞状 岁，中位年龄 64岁。标本均含有正常组织 ，所有标本均未经 细胞癌 53例，突变率为 18．8％(10／53)；腺鳞癌 32例，突变 化、放疗及靶向药物等抗肿瘤治疗。 率为50％(16／32)；小细胞癌突变率为 17．6％(3／17)。腺鳞 1．2 主要试剂与仪器 肿瘤组织 DNA抽提试剂盒购 自上 癌比鳞状细胞癌和小细胞癌突变率高，差异有显著性 (P 海伟进公司，聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction， 0．05)。18外显子突变率为 1．6％(3／192)，19外显子突变 PCR)引物购自上海生工公司，ABI一2700PCR扩增仪购 自美 率为 10．9％ (21／192)，21外 显子 突变 率为 17．7％ (34／ 国，核酸定量仪测定美国Eppendoff公司，DNA聚合酶 Hot— 192)。在鳞状细胞癌和腺鳞癌标本中检测到 18外显子突 starTaqDNAPolymerase购 自德国凯杰上海公司，测序纯化 变 ，二者差异无显著性 ；19外显子突变在各病理类型中均可 试剂盒购 自美国Promega公司，测序反应所用试剂盒 BigDye 检测到，各病理类型之间差异无显著性；21外显子突变在各 购 自美国ABI公司，基因测序仪3100．Avant遗传分析仪、数 病理类型中均检测到，腺癌和腺鳞癌比鳞状细胞癌突变率 据收集软件 Datecollection和分析软件DNAsegeneinganays． is5．1软件均购 自美国ABI公司。 高 ，差异有显著性 (P0．05)。结论 肺癌中腺鳞癌 EGFR 基因突变率较高，与鳞状细胞癌和小细胞癌相比差异有显著 1．3 序列及引物 按照www．ncbi．nlm．nih．gov提供的EG- FR基因组序列 (NM005228)设计引物：l8外显子上游引物 性 (P0．05)，腺癌和腺鳞癌EGFR基因21外显子突变率较 5一TG1_1TrCTACCAACTYCTGTC一3，下游引物 5一CAGTGAAA— 高 ，与鳞状细胞癌相 比差异有显著性。 CAAAGAGTAAAG一3；19外 显子上游引物 5一CAGTGTGAT— 关键词：肺肿瘤 ；表皮生长因子受体 ；