杂交蝴蝶兰PLB诱导研究.pdfVIP

杂交蝴蝶兰PLB诱导的研究 乔永旭 陈超 (唐山师范学院， 唐山，063000) 摘要 以蝴蝶兰优良杂交组合No mg‘L-1+椰子 影响类原球茎(PLB)的发生、增殖等因子进行系统研究。结果表明：1／4Ms+6一BAl0 种EA2003PLB的诱导有阻碍作用；叶子基部PLB的发生优于叶子的其他部位． 关键词：蝴蝶兰；类原球茎；诱导；增殖 蝴蝶兰(忍aI羽旧∞鲰墨旬16血协属于兰科蝴蝶兰属单茎性气生兰，以其体态轻盈、 花朵硕大、花色秀丽、观赏期长等非凡特色，被誉为“洋兰皇后，具有很高的观赏价 值和经济价值，深受世界各国人民喜爱Ⅲ。生产中蝴蝶兰很难进行植株繁殖，因其种子 极小，种胚发育不成熟，发芽率极低，所以种子繁殖和种胚培养均受到限制口1。目前多 采用组织培养和无菌播种两种途径进行繁殖n1，利用无菌播种繁殖，后代变异大，因而 利用组织培养繁殖是目前应用广泛的手段D1。近年来，我国利用组培技术对胚、花梗、 叶片、茎尖，以及根尖作为外植体进行组培研究。用茎尖作为外植体有可能丧失母株， 用花梗作外植体其数量非常有限，用种子繁殖极易产生变异。因此用蝴蝶兰无菌试管苗 的叶片作为外植体，既可减少对母株的伤害，取材又不受季节的限制，并且叶片多来源 广泛，是较理想的外植体n1。基于此本试验采用组培苗叶片为外植体，对蝴蝶兰类圆球 茎(PLB)诱导和增殖的主要因素进行了系统研究，以期为蝴蝶兰的快繁技术提供理论 依据。 1材料与方法 供试材料为唐山师范学院生命科学系细胞工程室提供的蝴蝶兰优良亲本杂交组合 No II(早)×N02(6)和蝴蝶兰优良品种EA2003的无菌苗。 1．1蝴蝶兰PLB的诱导 取蝴蝶兰无菌苗的叶片，将其分为叶尖、叶中和叶基三部分，并切成0．8cmX0．8cm 的小块，接种在诱导PLB的培养基上进行培养。其诱导率=PLB发生的个数／接种的叶片 数×100；死亡率=死亡的叶片数／接种的叶片数×i00(诱导率和死亡率分别为叶尖、叶 中和叶基三部分的平均值)。培养基处理如下：根据是否添加活性炭，基本培养基分别 定16组处理，具体如下： 1．1．1未添加活性炭(I组) L．1；A3：1／2MS+6一BAlOmg·L-1+椰子汁lOOg·L-I；A4：1／4 L-‘． 香蕉汁lOOg·L～。 1．1．2添加活性炭(II组) ⅡI：Bl：2MS+6一BhlOmg·L-1+椰子汁lOOg·L-1+活性炭1 L．1+椰子汁lOOg·L-1+活性炭1 炭lg·L-；B4：1／4 MS+6一BhlOmg·L-+椰子汁lOOg·L-,+活性炭lg·L～。 Ⅱ2：B5：1／2MS+6-BMOmg·L-1+椰子汁lOOg·L-1+活性炭1 L-1+苹果汁lOOg·L-l+活性炭1 活性炭1 g·L～。 培养基中含有：琼脂69·L-1，蔗糖20 g·L-1，pH为5．6。培养条件：温度为298K， 光照12h，光照强度2000Lx，培养条件下同。 以I。、II。两组中筛选出来的最优培养基为基本培养基，改变I。、II。中筛选出的 最佳添加物的质量浓度，设定试验，定为III组。通过预备试验得出最优培养基为基本 培养基，即1／4MS，最佳添加物为椰子汁，共设3组处理，具体如下： III：C。：1／4 MS+6一BAlOmg·L-,+椰子汁509·L-l；C2：1／4 汁lOOg·L-,；C。：1／4 L-1，蔗糖20 g·L～，活性炭1g·L～，pH为5．6。 以I。、II。两组中筛选出来的最优培养基为基本培养基，添加I：、II：中筛选出的最 佳添加物，通过改变激素6一BA的质量浓度，设定试验，定为Ⅳ组。通过预备试验得出 60 1／4MS，最佳添加物为椰子汁，共设4组处理，具体如下： 最优培养基为基本培养基，Rp Ⅳ：D，：】／4MS+6一