超声造影微血管成像及其定量分析对乳腺癌恶性转化过程血管生成变化地研究.pdfVIP

第二届血管和浅表器官国际超声研讨会 承办单位：南方医科大学南方医院中国人民解放军总医院 移 《造影微血管成像及其定量分析对乳腺癌恶性转化 过程血管生成变化的研究 李颖嘉张雪林龚渭冰吴风林刘红梅李传刚王倩 南方医科大学南方医院超声科(510515) 目的 应用能量多普勒、脉冲反相谐波实时灰阶超声造影微血管成像及时间一强度曲线 定量分析技术结合免疫组化方法探讨乳腺癌发生与演进过程中血管生成作用及其变化 规律，为乳腺癌高危人群的监测寻找客观简便的判断指标。 材料与方法 1．对象 正常乳腺组10例，单纯增生组20例，非典型增生组(atypicalhyperplasia，AH) 20例，导管内原位癌组15例，浸润性导管癌组30例，共5组95例。 入选标准：正常乳腺组为乳腺纤维腺瘤行区段切除术后经病理证实的结构正常的 瘤旁2cm处乳腺组织。乳腺增生分类参照Rosen分类标准，乳腺肿瘤组织学分类及诊 断标准参照2003年新版WHO乳腺肿瘤组织学分类标准。所有病例均经病理检查证实。 2．检查仪器及方法 2．1仪器检查 Inversion Harmonic，PIH)造影条件，机械指数(Mechanicalindex，MI)为0．07。 选用乳腺常规检测程序，彩色多普勒(Color Flow DopplerImaging，CDFI)多切面观察 后以能量多普勒(PowerDopplerImaging，PDI)对观察部位血流信号最丰富区域冻结并 存储图像，之后静脉弹丸式注射南方医院研制的“全氟显造影剂，0．02ml／kg，同步 存贮造影剂注射后三分钟的连续动态图像。 2．2图像分析 根据观察区域PDI显示的血流形态、数目及分布特点将血流按丰富程度由低到高 分为4级。0级：周边及内部未见血流信号：l级：少量血流，血流环绕病灶周围，内部 无或偶见点状血流；2级：中量血流，可见1条主要血管，其长度超过病灶的半径或见几 条小血管由周边向内部发出分支：3级：丰富血流。可见2条以上血管伸入病灶内部，或 血管相互连通成网状。 开启QLAB分析软件，启动微血管成像(microvascularimaging，MVI)程序，实时 观察造影剂微泡在微血管中的显像轨迹；对观察部位血流显像最丰富区域取样3次 (避开坏死区)获得感兴趣区血流灌注时间一强度曲线，由曲线得到以下参数：峰值强 the under 度(peakintensity，PI)，曲线下面积(area 第二届血管和浅表器官国际超声研讨会 承办单位：南方医科大学南方医院中国人民解放军总医院 to time，WOT)，取其均值。 peak，TTP)，廓清时间(wash—out 3．病理学检查 3．1髓染色 ’ 3．2免疫组化染色 抗体按SP试剂盒说明书操作。 结果判断：以细胞浆或细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性细胞判定标准。 微血管密度(microvessel density，M、，D)测定：参照Weidner方法。 VEGF和Flk一1／KDR表达测定：采用半定量积分法判定结果，阳性细胞数≤5％为0 分，染色强度黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，两者积分相乘，0-1分为 4．统计学处理 采用SPSSl3．0软件包进行统计分析。5组的计量资料用均数±标准差表示，方差 齐性则采用单因素方差分析(one-wayANovA)，方差不齐或计数资料比较采用非参数 秩和检验(GamesHowell检验)，以PO．05为有显著性差异。 结果 1．病理结果 1．1乳腺癌合并AH情况 (11／15)，浸润性导管癌合并hH60％(18／30)。 1．2CD34、VEGF、Flk-I／l【DR在各组中表达情况 各组病例CD34均呈阳性表达，阳性产物定位于微血管内皮细胞胞浆或胞膜