db%2fdb自发性糖尿病小鼠心肌细胞增殖、凋亡及相关因素与研究.pdfVIP

中文摘要 db／db白发性糖尿病小鼠心肌细胞 增殖、凋亡及相关因素研究 摘 要 目的：应用光镜、电镜、Ⅱ)■原位末端标记(n，N日，)法 和免疫组织化学方法，对db／db白发性糖尿病小鼠心肌懒胞 学改变，以期通过对小鼠心肌细胞增殖、凋亡及相关因素的研究， 为进一步研究糖尿病的发病机制提供实验资料。 背景：糖尿病是—种因胰岛素功能不全或靶细胞对胰岛素敏 感降低而引起的糖类、脂类、蛋白质紊乱的内分泌疾病。糖尿病 diabetes 分为1型和2型。2型糖尿病(non-insulin dependent 死的主要原因。糖尿病也是心衰的一个重要危险因素。 细胞上的胰岛素受体受到抑制对胰岛素没有反应胰岛素抵抗可 以造成高血压冠亡、病。本实验选取db／db自发性糖尿病小鼠， 此为非胰岛素依赖性糖尿病(N刀]DM，2型)的良好动物模型， 优于国内外现普遍采用的链尿菌素(STz)破坏胰岛所致的胰岛 素依赖型糖尿病0DDM，1型)动物模型。 饲养于无菌包中，自由摄水、饮食，近亲(兄妹)交配。其纯合 中文摘要 其纯合子1／4后代，即db／db小鼠表现为肥胖和高血糖，是研究 非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)的良好动物模型。分别选取2， 小鼠，每组6只，4％多聚甲醛灌流固定，取心脏，后固定，常规 石蜡包埋、切片，然后分别进行光镜、电镜、TUNEL法及免疫 组织化学研究。 结果： I在db／db糖尿病小鼠，随着病程进展，血糖逐渐升高，心膻心 肌细胞光、电镜下出现一定的形态学改变，所得结果如下： 11光镜下db／db糖尿病小丽心肌层心肌细胞排列紊乱，心肌细胞 肿胀，细胞问隙增宽。 12透射电镜下：db／db糖尿病小鼽【∑肌层心肌细胞肌原纤维排列 紊乱，胞质空泡化明显，线粒体广泛变陛，表现为嵴排列紊乱、 扭曲，甚至溶解、消失，线粒体呈空泡状。可见少量凋亡的心肌 细胞，核染色质边集，核膜断裂。 】_3扫描电镜下：db／db糖尿瘸小鼠心肌细胞之间间隙增大细胞直 径明显增加，心肌连接闰盘中指状突起变稀琉参差不齐，突起末 端膨大，闰盘台阶减少。 2心肌细胞TUNEL染色及免疫组织化学结果如下： 2．1 细胞细胞核，呈棕黄色深染。随糖尿病病程延长，糖尿病组PCNA 1)并且每年龄段糖尿病组阳 阳性率呈觋明显增高趋势(PO．0 性率明显高于相应正常对照组(PO．01)。 2|2凋亡：在糖尿病及正常小鼠心肌细胞均有凋亡发生。db／db糖 尿病小鼠凋亡心肌细胞表现为染色质凝集、边集，核固缩。随糖 尿病病程进展，糖尿病组凋亡阳性率呈现明显增高趋势(P 中文摘要 O．01)并且每年龄段糖尿病组阳性率明显高于相应正常对照组(P O．01) 23BcL．2：在糖尿病及正常小鼠心肌细胞免疫阳性产物以细颗 粒状弥散分布于部分l∑肌细胞胞浆。db／db糖尿病小鼠随糖尿病 病程进展，糖尿病组BcL-2表达呈递减趋势，而且，糖尿病组比 对照组表达率低(P0．01)。 2．4 Bax：糖尿病小鼠心胍细胞免疫阳性产物以细颗粒状弥散 达呈增加趋势，而且，糖尿病组比对照组表达率高(PO．01)。 2．5 闰盘处，排列整齐。与正常对照相比，db／db糖尿病组小鼠随着 发病时间的延长，Cx43阳性颗粒在心肌细胞问表达数量逐渐增 加且表达部位区也发生了明显的改变，阳性颗粒呈点状、片状不 规则分布，多数分布于细胞侧．侧处连接，少数位于闰盘处。 处均有少量表达，少数分布在细胞与细胞之间侧面连接处。 结论：糖尿病性心脏病是糖尿病远期的严重并发症之一一些 原有的心血管疾病可能会在糖尿病出现时变得严重．由此，糖尿病 时，由于体内多种因素如：肥胖，高糖血症并发的高血压高脂血症 等的影响下，心脏的功能受到影响。在本试验中，随着病程的延长， 糖尿病小鼠明显的肥胖，少动，反应迟钝．光镜下虽然未见明显的心