IL-5与IL-17在中重度儿童哮喘中作用与研究.pdf

IL．5与IL．17在中重度儿童哮喘中的作用研究 中山大学附属第二医院儿科 硕士研究生：李静 导 师：檀卫平副教授 中文摘要 研究背景 支气管哮喘是一种气道慢性炎症性疾病，轻度儿童哮喘的多数能控制良好， 中重度哮喘部分难以控制，其机制不明，因此深入研究中重度儿童哮喘的炎症机 制有望改善其疗效。哮喘发病过程中气道重塑是其中特征性表现，既往认为参与 气道重塑的炎症细胞以嗜酸性粒细胞为主，现已有研究发现支气管哮喘诱导痰中 其它炎性细胞如中性粒细胞、T淋巴细胞、肥大细胞、巨噬细胞比例明显增高， 其中以中性粒细胞炎性反应最多。 迄今为止，支气管哮喘慢性炎症、气道重塑的细胞机制尚未完全清楚。辅助 T 性T细胞(helper 近年发现EOS炎症理论无法解释一些重症哮喘病理现象，并有资料显示辅助性 T细胞如11117及中性粒细胞可能参与了哮喘的慢性炎症过程。 过度活化的啦细胞产生的IL．5引起嗜酸性粒细胞的活化、趋化，嗜酸性 粒细胞能合成和分泌大量的细胞毒素及促炎性介质，引起一系列的组织损伤，如 上皮细胞的缺损，血浆外渗，气道高反应性及组织炎症的启动和维持，最终导致 肺功能的紊乱和缺失，但在NEA亚型中IL．5作用如何尚无报道。 要还是来源于T1117。IL．17的主要生物学功能是介导中性粒细胞促进炎性反应， 与类风湿性关节炎、哮喘、多发性硬化症、银屑病和移植排斥反应密切相关。动 物实验及体外实验显示，n17活化后产生IL—17，在粒细胞集落刺激因子 colony (铲anulocyte 干细胞分化成中性粒细胞，刺激中性粒细胞活化、聚集至气道，并抑制中性粒细 9，MMP．9)、转 化生长因子-p(trau啮fIom血g 织的损伤和纤维化。 中性粒细胞与T1117在支气管哮喘发病中的作用机制仍未研究清楚，Th-17 作为CD4+T细胞调节中性粒细胞参与哮喘发病的中介备受关注，有研究报道成 人哮喘患者体内的IL．17水平明显高于正常人。另有资料显示以中性粒细胞炎症 为主的哮喘对目前以吸入性糖皮质激素(i1111aled 合治疗效果差，深入研究中性粒细胞及11117在儿童中重度哮喘中的作用，可望 为难治性哮喘寻求新的治疗靶点。 最近有研究通过胸部高分辨CT(1ligh-resolutioncomputedtoInography， HRCT)检查测定成人气道壁面积和厚度，结果显示哮喘患者气道壁厚度、气道 壁面积与气道总截面积之比明显高于健康对照者，哮喘患者的支气管壁厚度与病 情严重度成正相关。作为无创性检查，高分辨CT用于儿童哮喘的气道重塑评估， 国内尚无报道。 研究目的 1．通过对哮喘患儿痰液及血液的研究了解IL．5及IL．17在儿童中重度哮喘中的 作用； 2．探讨HRCT用于评估哮喘儿童气道重塑情况的可能性。 研究对象与方法 1．研究对象 选择中重度支气管哮喘患儿65例，其中急性发作期哮喘患儿为45例，缓解 期哮喘患儿为20例，20例缓解期患儿均经正规联合治疗达到临床缓解。急性发 作期按诱导痰的细胞分类分为嗜酸细胞性哮喘(eosmpllilicasthna，EA)组25例 及非嗜酸细胞性哮喘(non-eos如p11ilic 喘严重度分级均属于三、四级患儿，分为中度持续组20例；重度持续组25例。 Ⅱ 临床缓解期患儿按诱导痰的细胞分类分为嗜酸细胞性哮喘组10例及非嗜酸细胞 性哮喘组10例。选取8例病程较长的病人于其临床缓解期行胸部高分辨CT，8 例患者病程范围为3～8年，病程中位数为4．5年。 同期健康儿童20例设为正常对照者。经统计分析，两组男女比例、年龄均 存在可比性。 2．研究方法 2．1诱导痰的采集、处理：由喷射式雾化仪吸入3％高张盐水10～15I血，将咳 出的痰液收集至约1lIll，取粘稠部分痰液加入适量的裂解液(0．1％DTT)，混匀 后水浴并振荡十分钟；将痰液用40¨m滤网过滤，2500转离心lO分钟 色和w胁eGiemasa染色，计数200个非上皮细胞进行细胞分类，分类计算中性 粒细胞、嗜酸细胞、淋巴细胞、单核细