应用免疫胶体金技术结合酚-氯仿法提取甲醛固定组织DNA.pdfVIP

ChineseJournalofForensicSciences，2015，No．1TotalNo．78 鉴 定 实 践 ForensicPractice 应用免疫胶体金技术结合酚一氯仿法 提取 甲醛固定组织 DNA 郑长发 ，明绍利 ，牛青山 (1．大连市公安局 西岗分局 ，辽宁 大连 116012；2．中国刑事警察学院，辽宁 沈阳 110854) 摘 要：目的 探讨应用免疫胶体金技术结合酚一氯仿 法提取 甲醛 固定组织DNA的可行性。方法 采用 4％普通 甲醛溶液 室温 (15～20qC)下固定肝脏组织 10例 ，不同时间后取样 ，分别用免疫胶体金技术结合酚一氯仿 法和磁珠 法提取 DNA，经 PCR扩增进行 STR分型．比较两者差异性。结果 甲醛 固定时间和DNA提取方法影响甲醛固定组织的STR分型效能。固定 时间在 1周至2个月时，两种方法有显著性差异 (尸O．05)，固定时间在24h和5个月以上时，两者无显著性差异 (JD0．05)。 结论 免疫胶体金技术结合酚一氯仿法可用于提取 甲醛固定组织DNA，在一定 固定时间段 内，其优于磁珠法。 关键词 ：法医遗传学；免疫胶体金 ；甲醛 固定组织；DNA提取 中图分类号：DF795．4 文献标志码：A doi：10．39690．issn．1671-2072．2015．01．009 文章编号：1671—2072一(2015)01—0042—03 DNA Extractionfrom Formaldehyde—fixedTissuebyImmuno-colloidalGoldCombined withPhenol-chioroform M ethod zHENGChang-fa1，MINGShao-lil，NIUQing-shan2 (．XiGangBrnachofDalina PublicSecurityBureau，Dalina 116012，China；2．ChinaCrimindPoliceUniversity， Shenynag1Jo854．China) Abstract：ObjectiveToevaluatethefeasibilityofextractingDNAfromformaldehyde-fixedtissuesbyimmuno-colloidalgold combined withphenol—chloroofrnlmethod．M ethodTen livertissueswerefixedby4％ ofrmaldehydesolutionfordifferent durationat15～20℃．DNAwasextractedfrom thesetissuesatdifferenttime—pointbybothmagneticbeadmethodandimmuno— colloidalgoldcombinedwithphenol-chloroform method．AfterPCRandSTR genotyping，theDNA extractionresultsofthese twomethodswerecompared．ResultsTheSTR profiling efficiency offixed tissueswasrelevantto theformaldehydefixing durationandmethodofDNA extraction．Whenthefixedtimewasfrom oneweektotwomonths，therewassignificantdifference betweenthetwomethodsofDNA extraction (PO．05)．Butnosignificantdifferencewasobservedwhenthefixedtimewas withinoneweek orafterfive months (P0．05)．Conclusion Immuno—colloidalgoldcombined with phenol—chlorofo．m1