毛细管区带电泳用于几种香豆素电离常数线性模型地研究.pdfVIP

第七届全国毛细管电泳及相关微纳分离分析学术报告会文集 上海 毛细管区带电泳用于几种香豆素 电离常数线性模型的研究 宋子旺，童萍，张兰+，陈国南 (食品安全分析与检测技术教育部重点实验室 福州大学运动科学研究中心，福建福州，350002) 性关系图，测定了7一羟基香豆素、东莨菪内酯、异秦皮啶、祖师麻甲素、秦皮乙素等五种香豆素的 电离常数值，并将测定结果与紫外分光光度法测定值进行比较，得到了令人满意的结果。 关键词：毛细管区带电泳，安培检测，电离常数，7一羟基香豆素，东莨菪内酯，异秦皮啶，祖师麻甲 素，秦皮乙素 电离常数(pKa值)是药物在生产、制剂、分析、储存以及在体内吸收、分布、代谢研究中的 一个重要参数。香豆素类小分子是常见的天然药物活性成分之一，研究其pKa值对于这类药物在临 床药学和制定合理的工艺条件等方面具有重要的指导意义。离解常数的测定方法有电势滴定法[¨、紫 外可见分光光度法‘21和毛细管电泳法(CE)[31等，实验证明CE法是一种十分简便而有效的方法。 l理论部分 根据弱酸(HA)的电离常数表达式，以及缓冲液中A。的有效淌度(p。。)表达式可得： 1 Kw 1 1 1 J 面2面而+一laAOHU印 Ka阻[‘]。 L(1) 即截距与斜率之比等于KaK。～。 溶质的有效淌度可以通过下式由表观淌度(P-app)和电渗淌度(“。。)得到： lat9=l-ieo-u哪2芋(七一七， (2) 式中L为毛细管的长度，V是工作电压，t。，t。pp分别为溶质的表观迁移时间和中性标记物迁移时间。 2仪器和试剂 自组装毛细管电泳仪，BAS LC．4C恒电位安培检测仪(Bioanalytical 时器的高压电源(0～+30 立化电子有限公司)；硅熔毛细管长69 mol／L KCL)电极；辅助电极：铂丝；工作电极为自制的碳圆盘电极(直 极系统，参比电极：Ag／AgCl(3 径为0．3 酯、异秦皮啶、祖师麻甲素、秦皮乙素均购自中国药物生物制品检验所(中国，北京)：7．羟基香豆 素购白百灵威化学试剂有限公司(中国，北京)。 3结果与讨论 3．1紫外分光光度法 作者简介：宋子旺，1983年出生，男，硕士 19 第七届全国毛细管电泳及相关微纳分离分析学术报告会文集 上海 基金项目：福建省科技重大专项，福建省科技厅自然科学基金(B05 在250C室温，选定的波长下，分别测得7一羟基香豆素在0．1mol／L的NaOH，0．1mol／L的HCL 吸光度，从而求得对应pH下计算出东莨菪内酯、异秦皮啶、祖师麻甲素和秦的7一羟基香豆素的pKa 值。同理可测定并皮乙素的pKa值，如表1所示。3．2毛细管电泳法 行电泳分离，并记录中性标记物及各个样品的迁移时间，然后根据式(2)分别计算出各组分的有效淌 CE—AD法测定结果与紫外分光光度法测定的结果进行比较。 Table1 of valuesdeterminedCEandUV pka by Comparison 忽略了离子强度的影响，与实际条件有所偏差。如果要进一步提高准确度，可以采用非线性模型。 在实际测定中，缓冲溶液pH值在一定范围内变化， 附和相互交换作用，导致电渗流的降低，最终造成pKa的偏低。(3)温度对电离常数会产生很大的 影响，因而由焦耳热引起的柱温变化也是