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会议交流(全文)
糖尿病性心肌纤维化病变和肌动蛋白异常
表达的研究
中国医科大学附属第一医院急诊科(110(101)吴伟张锦 邱阳
细胞学病变和心肌细胞间质纤维沉积及纤维化 心室4mm厚组织两块,将一份标本立即放入冻存管
是l临床上引起心肌舒张功能受损及糖尿病性心肌病 中,放人液氮中保存,待测心肌羟氨酸含量;一份标
的一种重要因素。转化生长因子8(transforming-
factor
growth beta,TGF、beta)是生物体内广泛存在的 m和转化生
埋待测心肌细胞内collagenI、collagen
一种极为重要的新型细胞因子。它与许多心血管、 长因子禹(TGF.岛)及aetin。
肝脏、肾脏、肺疾病及创伤修复等的发生发展和病理 2.测定心肌胶原总含量:以心肌羟氨酸水平来
o证实在培养兔心
生理有密切关系。Eghbali等人-l 代表心肌胶原总含量。以氯胺T法测定羟脯氨酸含
肌成纤维细胞中加入TGF-p,,能使I型胶原蛋白
量。称取冰冻左心室心肌组织100mg,网搓匀浆后
(collagenI)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenm)、纤维粘连
蛋白mRNA及蛋白水平表达增加。间质性胶原基质
围绕在心肌细胞的周围,以支持心肌细胞的正常结 2
构,以及冠脉的微循环结构与功能的完整性。除此 液0.5ml,再加0.05M氯胺T1111l,混匀氧化6
rain;然
之外间质性胶原还决定着心室舒张功能及心窒体积
的大小;协调由心肌细胞产生的收缩力向心室腔中 10%对二氨苯甲醛lml80qC水浴6
min,取出后冰水
的传导-2J。因此,心脏中的间质性胶原基质蛋白成 浴30
分的降解,或胶原成分过度的产生,都将破坏心肌的
力学性质、心室的结构与功能。研究资料表明L3’4』 按上述相同步骤制作标准曲线。对照标准曲线,求
在心肌病变时心肌细胞骨架蛋白如肌球蛋白 得羟脯氨酸含量,然后换算成每克心肌组织中羟脯
氨酸含量,再乘以7.46即得心肌胶原总含量。
(myosin)、肌巨蛋白(titin)、肌动蛋白(actin)和结蛋白
I、C01.
3.心肌免疫组织化学染色:用于Collagen
(desmin)发生了异常表达。Depre等人【51认为糖尿
病鼠心肌型d-actinmRNA表达减少。但糖尿病心肌/agen
病细胞骨架蛋白病理性表达尚有不同的观点,为此 采用石蜡切片,切片厚6pm抗原染色如下程序:(1)
我们进行研究。
烤箱60℃30
min以使切片紧密黏附。(2)切片常规
材料和方法
min
脱蜡至水。(3)蒸馏水新鲜配置3%H202,室温5
~10
1.制造糖尿病大鼠心肌模型:体重250~3009min以灭活内
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