贵州山羊痘的病原学研究和血清学检测.pdfVIP

第27卷增刊 内 蒙古农业大学学报 V01．2702S 2005年7月 Jul．2005 JournalofInner MongoliaAgriculturalUniversity 文童编号：1009—3575【2005)02S一0046—01 贵州山羊痘的病原学研究与血清学检测。 THEETloLoGICALSTUDYANDSERoLOGICAL DETECTION0FGOATPOXINGUIZAHOU 周弈君1． 何光志1。 虞天德2。许乐仁1 (1． 贵州大学，贵稿550025；2．贵州省兽防站，贵阳550003) 2002年10月以来，我省修文、镇远、铜仁、晴隆、遵义、德江、沿河和六盘水8个地区养羊较为集中的乡 (镇)相继暴发流行一种全身皮肤出现痘疹的高度接触性、发热性传染病。主要表现为体温升高达40℃以 上，食欲减退乃至废绝，精神萎顿，眼结膜潮红、流泪，鼻和眼流脓性分泌物。潜伏期为1周～2周，大部分病 羊在眼周围、唇、鼻、颊、腹部和尾内侧出现大小不等的红疹，严重时波及全身皮肤和部分内脏器官，14d后形 成小的丘疹突出于皮肤和内脏器官表面，并逐渐扩大为灰白色硬结和丘疹一水疱型，后者几天后转为水疱， 水疱破溃后形成痂块，最后痂块脱落遗留白色的痕迹。本病从外地引入带毒羊后，陆续发病并很快蔓延至全 群。发病率和死亡率较高，孕羊大多流产或产弱羔，羔羊比成年羊易感。根据临床症状和剖检病变可对山羊 痘作出假定性诊断，确诊必须依赖于实验室检查。山羊痘病毒感染以后抗体反应水平较低，血清学诊断的应 用受到一定限制。通过“中文科技期刊数据库检索”查询自1989年以来全国的兽医类主要期刊，关于山羊痘 察病毒粒子的形态特征(5／133，3．76％)；接种鸡胚绒毛尿囊膜观察形成的痘斑(4／133．301％)。国外学者 山羊痘的研究工作中，国内很少报导病毒分离与鉴定的内容，对山羊痘研究多采用鸡胚接种、犊牛睾丸原代 细胞培养物通过电镜观察。本研究从以下几个方面进行：①分别取患病山羊皮肤和瘤胃黏膜痘疹、鸡胚绒 毛尿囊出现的痘斑、病毒感染细胞培养物为材料，按常规方法作超薄切片，电镜观察发现大量具有典型痘病 毒形态特征病毒粒子。②痘疹材料接种鸡胚绒毛尿囊膜，感染鸡胚可见胚体充血、出血、绒毛尿囊膜增厚且 聚集成簇、形成拉网状的细胞病变效应，由中国兽药监察所提供的山羊痘参考血清能够抑制这种细胞病变效 株；从内蒙古生物药品厂的活疫苗分离出i株山羊痘疫苗毒株．③将病毒感染细胞培养物人工接种健康山 接血凝试验(RPHA)在我省修文、镇远、铜仁和遵义等8个地区养羊较为集中的乡(镇)广泛开展山羊痘流行 病学调查和血清学监测。对H—GZ贵州分离毒作分离鉴定，探索病毒感染细胞的部位和分布，以及在血清 学诊断中的科学意义。 通过电镜超薄切片观察到皮肤、黏膜痘疹；鸡胚接种观察到绒毛尿囊膜上出现痘斑和感染细胞可见典型 痘病毒粒子，绒毛尿囊膜充血、出血、增厚及明显痘斑等病变；感染细胞出现典型的细胞病变，这种病变能被 山羊痘参考阳性血清抑制，由此分离出一株山羊痘野生强毒，命名为H—GZ。取痘疹材料接种BHK一21、 Veto—E6，经细胞传代增殖培养物感染健康山羊复制出与自然病例相似的症状和病变．细胞培养物经硫酸 铵盐析、SephadexG一200层析制备了山羊痘沉淀抗原，该抗原能在琼脂扩散反应和对流免疫电泳试验中与 山羊痘参考阳性血清、山羊痘免疫血清出现沉淀线，所形成沉淀线能被山羊痘的参考阳性血清特异性抑制， 与其他常见的动物病毒病阳性血清不发生交叉反应。采用兔抗山羊痘高免学血清提纯抗体，致敏绵羊红细 RPHA具特异性，而RPHA比琼脂扩散试验(AGP)敏感。 o收辅日期：2005—06—20