生物化学基础 教学课件 作者 靳利娥刘玉香秦海峰谢鲜梅 等编 第3章 酶化学.ppt

尚辅网 尚辅网 尚辅网 (1) 不可逆抑制作用 定义： 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活，不能用透析、超滤等方法予以除去。 举例： 有机磷化合物 如：二异丙基氟磷酸、敌敌畏等 重金属离子及砷化合物 如：巯基酶、对氯汞苯甲酸等 氰化物、烷化剂 尚辅网 　 有机磷化合物对羟基酶的抑制 路易士气对巯基酶的抑制 尚辅网 （2） 可逆抑制作用 定义： 抑制剂以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 类型 竞争性抑制、非竞争性抑制、 反竞争性抑制 尚辅网 可逆抑制作用之竞争性抑制作用 定义 抑制剂I与底物S的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。 I S 尚辅网 P 竞争性抑制作用反应模式图 例如：丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 + FAD 延胡索酸+ FADH2 琥珀酸脱氢酶 尚辅网 I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及［S］； 动力学特点：Vmax不变，表观Km增加。 抑制剂↑ 无抑制剂 1/v 1/[S] 尚辅网 可逆抑制作用之非竞争性抑制作用 定义：酶同时与底物及抑制剂结合，引起分子构象变化，并使酶活性下降。但这类物质并不与底物竞争与活性中心的结合，所以称非竞争性抑制剂。 如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+）以及EDTA等，通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制 I S 尚辅网 非竞争性抑制作用模式图 + I EI+S ESI ES P+ E E+S + I 尚辅网 非竞争性抑制作用特点 抑制剂与底物结构不相似， 抑制剂与酶活性中心以外的基团结合。 Vmax下降，Km不变 尚辅网 可逆抑制作用之反竞争性抑制作用 定义：抑制剂只能和中间产物结合，形成ESI，而不能和酶直接结合，ESI不能转变成产物，从而抑制酶的活性。 如 肼类化合物引起胃蛋白酶反竞争性抑制作用 I S 尚辅网 反竞争性抑制作用特点 抑制剂与底物结构不相似， 抑制剂与酶活性中心以外的基团结合。 Vmax和Km均减小（1+[I] / Ki）倍 尚辅网 有无抑制剂存在时结果比较 尚辅网 第四节 酶的调节与量度 一、 别构酶及酶的别构（变构）效应 二、酶的多种分子形式 同工酶 三、 酶原的激活 尚辅网 一、活力测定与酶的活力单位 1、酶活力 检测酶含量及存在，不可直接用酶的“量”（质量、体积、浓度）来表示，常用酶催化某一特定反应的能力来表示酶量，即用酶的活力表示。 酶活力常以最适条件下酶所催化的化学反应的速度来确定。 2、酶活力测定方法：终点法 动力学法 尚辅网 酶活力的表示方法 活力单位（active unit） 习惯单位（U）: 底物(或产物)变化量 / 单位时间 国际单位（IU）: 1μmoL变化量 / 分钟 Katal（Kat）：1moL变化量 / 秒 比活力 = 总活力单位 总蛋白mg数 = U(或IU) / mg蛋白 转换系数（Kcat）底物（ μ moL）/ 秒·每个酶分子 尚辅网 二 、酶活性的调节 （一）酶原与酶原的激活 定义：酶原 有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，此前体物质称为酶原。 酶原的激活 在一定条件下，酶原向有活性酶转化的过程。 尚辅网 （二）变构酶 定义：变构调节 一些代谢物可与某些酶分子活性中心以外的部位可逆地结合，使酶构象改变，从而改变酶的催化活性，此种调节方式称变构调节。 该酶称为变构酶 。 分变构激活与变构抑制两种 尚辅网 变构酶的特点 通常具有四级结构，存在协同效应； 含有催化亚基和调节亚基 [S]-v关系曲线为S形。 V 尚辅网 （三） 酶的共价修饰调节 共价修饰 其他酶催化下，酶肽链上一些基团可与某化学基团（如：磷酸基、乙酰基等）发生可逆共价结合，从而改变酶的活性。 常见类型 磷酸化与脱磷酸化（最常见）、乙酰化和脱乙酰化 甲基化和脱甲基化、腺苷化和脱腺苷化等 尚辅网 （四）同工酶(isoenzyme) 同工酶定义: 是指催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性