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尚辅网 尚辅网 * 尚辅网 细胞壁结构和化学组成 2 概述 1 4 细胞的破碎与分离 基因工程表达产物后处理的特殊性 4 细胞壁的破碎 3 尚辅网 4.1 概述 尚辅网 4.2 细胞壁结构和化学组成 1 2 细菌 真菌和酵母 3 藻类 尚辅网 4.2.1 细菌 尚辅网 4.2.1 细菌 接上图 尚辅网 (1)肽聚糖 (2)氨基酸 (3)磷壁质 (4)糖 (5)脂质 4.2.1 细菌 尚辅网 4.2.2 真菌和酵母 (1)糖及其氨基衍生物 (2)氨基酸 (3)脂质 尚辅网 藻类细胞壁非常复杂,其主要结构成分,与其他真核生物一样,是纤丝状的多糖类物质。 4.2.3 藻类 尚辅网 4.3 细胞壁的破碎 1 2 破碎率的评价 细胞破碎的方法 尚辅网 4.3 细胞壁的破碎 尚辅网 破碎率定义为被破碎细胞的数量占原始细胞数量的百分比,即: (1)直接计数法 (2)间接计数法 4.3.1 破碎率的评价 尚辅网 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 (1)固体剪切方法(珠磨) 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 ①理论依据 破碎作用将遵循一级动力学定律: 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 4.3.2 细胞破碎的方法 ②破碎的速率和效率 a.转盘外缘速度 尚辅网 破碎效率E被定义为: b.细胞浓度c 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 c.珠粒大小 d.温度 e.流量Q (2)液体剪切方法 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 破碎分率与悬浮液通过匀浆器的次数有关,也服从一级反应定律: 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 (3)超声波法 ①理论依据 在用于细胞破碎的容器中,流体动力学按照完全混合方式,蛋白质释放动力学遵循一级反应定律: 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 ②超声波破碎的影响因素 a.振幅 b.细胞悬浮液的黏度 c.表面张力 d.被处理悬浮液的体积 e.珠粒的体积和直径 f.探头的形状和材料 g.细胞悬浮液的流速 (4)其他破碎方法———非机械法 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 ①酶法溶胞 ②化学法 ③物理法 包括渗透压冲击法、冻融法和干燥法。 ④其他方法 4.3.2 细胞破碎的方法 尚辅网 4.4 基因工程表达产物后处理的特殊性 尚辅网 Thank you * * * * *
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