A15.SHP-1抑制HepG2细胞生长机理的研究.pdfVIP

年龄可以作为预测肝纤维化程度的指标，这与肝纤维化的进展过程具有时间依赖性是一致的。血清 GGT具有预测肝纤维化的价值，且不受胆红素和转氨酶水平影响。病毒性肝炎患者常伴胆管损伤．早期 的胆汁淤积和表皮生长因子增加都可能与伴随纤维化程度加重的血清GGT增高有关。血小板数量减少 对重度肝纤维化的预测价值也已经证实，随着纤维化的增加和门脉高压的加重，血小板在增大的脾脏内 被破坏增加，肝细胞产生血小板生成素减少。多数资料显示血清HA是在纤维化四项中与肝纤维化分期 相关性最好的指标，本研究再次证实了这一结果。AST水平同肝组织学病变、尤其肝纤维化进展有良好 的相关性，本研究中该指标人选Acfivelndex模型使其对于肝脏炎症活动的预测能力得到提高。 综上所述，我们针对判别肝纤维化程度、肝纤维化活动度分别构建了无创性诊断模型．经过验证、 患者的肝纤维化状况作出有效判断，从而在一定程度上替代肝穿指导临床治疗和随访病情转归．具有十 分重要的现实意义。 A15．SHP一1抑制HepG2细胞生长机理的研究 北京地坛医院(100011)吴澄宇樊文梅宋蕊 酪氨酸磷酸化是调节真核细胞信号途径的一个关键的机制。酪氨酸残基的磷酸化水平主要通过蛋白 磷酸醅氨酸残基的去磷酸化起相反的作用。PTKs活性的增加能促进酪氨酸磷酸化的蛋白质的蓄积，导 致异常的细胞增殖与分化并能诱导肿瘤的发生及其他肿瘤相关的疾病。PTP活性的下降同样能导致细胞 内酪氨酸磷酸化蛋白质水平的提高。SHP一1是一个蛋白酪氨酸磷酸酶，是调控细胞酪氨酸磷酸化水平 的一个关键因子，在许多肿瘤中SHP一1的表达明显降低或者丢失；另一方面，当SHP一1被转导进入 SlIP一1表达缺失或降低的细胞株时，这些肿瘤细胞的生长被抑制。由于SHP一1调控细胞蛋白酪氨酸激 酶水平，因此推测SHP一1在抑制肿瘤的生长、增殖和分化中扮淀重要的角色。 材料与方法 验室的保存细胞株(最初来自于美国ATCC)。 对Romas及H9细胞，添加2Mra的L一谷氨酰胺，10Mm HEPES，IMm丙酮酸钠，4．59／L葡萄糖， 质体转染试剂盒Lipofectamine“2000购自lnvitrogen。 2．RT—PCR：用QIAgene RNA进行第一一链的合成应用Invitrogen公司试剂盒(Carisbad，CA buffer，2raMMgCl2，2U dNTP，and Taqpolymerase(prontega)，0．2nd．_I1pmol／td的正义链及反义链引物。 72U 灯下成像。 96细胞增殖测 胞／孑L的浓度24孔板37℃培养。细胞在转染48小时后每24小时计数一次。应用CellTiter 定试剂盒(Pr—e鼬)检测细胞代谢产物胛r，方法按说明书进行。 ——9‘—— 4．Westem B10Uing用TritonX一100裂解缓冲液提取蛋白(10mMIris—HCINaCI． pH7．4，100mM 1mM EDTA，lmMEGTA，lmMNaF，20mM N舢P207，2mM Na3V04，1％Triton x一100，10％斟yeerol， 0．1％SDS，0，5％deoxycholate，hnMPMSF，lpg／ml leupeptin，and5m／ma 测试剂盒测定蛋白。相同量的总蛋白用10％的SDS凝胶电泳分离，转印到硝酸纤维膜上杂交，曝光。 5．软琼脂：表达SHP一1及SlIP一1