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细胞膨胀毒素对副猪嗜血杆菌致病机理的研究 周明光 徐高原 张 强 赵建平 金梅林 武汉科前动物生物制品有限责任公司，华中农业大学，武汉430070 摘要：首次鉴定副猪嗜血杆菌5型的基因组中编码2个细胞膨胀毒素家族(Cdts)，每个Cdts由CdtA， CdtB和CdtC3个亚单位组成。单独CdtB可以诱导细胞周期抑制，CdtA和CdtC明显促进CdtB诱导细胞 周期G2期抑制的能力。Cdt各亚单位可以相互作用形成一个有活性的全毒素诱导最大毒性作用。此外我们 在CdtC中鉴定出一个非典型的CRAC结合位点，CRAC结合位点77位氨基酸的突变导致Cdts毒性活性的降 低。免疫印迹结果显示15个HPS标准血清型中都表达CdtB亚单位和呈现细胞毒性，说明Cdts是HPS(一) 个非常保守的毒力相关因子。 150 国家农业行业科技国家生猪产业技术体系：第十四届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会论文集 3．1Cdts对细胞的毒性研究 细胞毒性试验表明当CdtA，CdtB和CdtC 3个亚单位都存在的情况下才能发挥最大的毒性作用。CdtA (Fig．1)。 露黛畸鳝蝴‘ 囤 图1不同Cdt亚单位组合诱导细胞毒性的能力 3．2CdtC含有一个非典型的CRAC位点 对比以后，HPS CdtC中 CRAC位点的77位点氨基酸的突变降低了Cdts对细胞毒性作用。 CRAC●lte (L／V)ZI_5-YXt_5(R／K) 4．口d妇I恻a翻目船翻暇豳胁帮 esL Y7l I D lGK74 H．pa嘴叠h 7，LVDV77ⅣK79 A P=UUI卫1 60 圜(、(ItB+(?dtC” 国fdtB+(dtCv77Y ‘，40 日 (1dtB+(’dt(?V77A C control 皿Negative ‘疗 m 姜20 0 rB， 图2序列分析ItPS CdtC中CRAC位点和评估CRAC位点突变对细胞毒性影响 国家农业行业科技国家生猪产业技术体系：第十四届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会论文集 151 3．3CdtB在各血清型中是保守表达的 我们调查了CdtB在其它标准血清型的流行情况。结果显示，所有15种标准血清型的肝s都表达 M 0’6r． 1 2 3 4 6 8 7 8 ‘ 一一，～一一一…_· M 016譬 9 10 11 12 13 14 1§ ●。_-_●-，__—●! A 黼一裔蔫；一·-▲—_-—d。B